细胞名称 小鼠成肌细胞；C2C12 形态特性 成肌细胞 生长特性 贴壁生长 特征特性 这是D. Yaffe 和 O. Saxel建立的小鼠成肌细胞株的亚克隆(由H. Blau等人构建)。C2C12细胞株分化很快，形成可伸缩的肌管并生成特征性的肌蛋白。 用骨形成蛋白2(BMP-2)处理，导致分化途径从成肌细胞转换成成骨细胞。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清，10% 传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况 PN5 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 100mg 吲哚布芬 含量测定 常温，避光 101060-201001 100mg 托吡酯 HPLC含量 常温，避光 101061-201001 100mg 盐酸曲普利啶 含量测定 常温，避光 101063-201001 100mg 米力农 供HPLC法 常温，避光 101065-201001 30mg 1,6-二氢-2-甲基-6-氧代 供检查用 常温，避光 101066-201001 100mg 甲磺酸倍他司汀 含量测定 常温，避光 101076-200901 100mg 尼可地尔 HPLC含量 常温，避光 101079-201001 100mg 磷酸奥司他韦 含量测定 常温，避光 101096-200901 100mg 普瑞巴林 供HPLC法 常温，避光 101106-201001 50mg 山梨醇 供检查用 常温，避光 101109-201001 200mg 地塞米松磷酸酯 供HPLC法 常温，避光 101116-201001 50mg 非诺贝特杂质Ⅰ 供检查用 常温，避光 101121-201001 50mg 非诺贝特杂质Ⅱ 供检查用 常温，避光 101122-201001 30mg 2-巯基* 供检查用 常温，避光 101124-201001 100mg 1,3-丙二醇 供检查用 常温，避光 101126-201001 50mg 可的松 供HPLC法 常温，避光 101128-201001 50mg * 供检查用 常温，避光 101132-201001 20mg 消旋山莨菪碱杂质I 供HPLC含量 常温，避光 101135-201001 20mg 阿托酸6β-羟基-3α-托品酯 供HPLC含量 常温，避光 101135-201001 50mg 硫唑嘌呤杂质 供检查用 常温，避光 101138-201001 50mg 10-甲氧基-4-（1-甲基-4-哌啶基）-4H-苯并[4.5]环庚[1.2-b]噻吩-4-醇 供HPLC法系统适用性 常温，避光 101141-201001 50mg 富马酸酮替芬杂质Ⅰ 供HPLC法系统适用性 常温，避光 101141-201001 100mg 氢后马托品 供鉴别用 常温，避光 101143-201001 50mg 反式帕罗西汀 供检查用 常温，避光 101144 lectin 9 半乳糖凝集素9（抗原） Oct-4 胚胎干细胞关键蛋白(多肽) OPN(osteopontin) 骨桥蛋白（抗原） P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A) 抑癌基因p16（抗原） p21/WAF1/CIP1 p21 核分裂抑制因子之一（抗原） p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗原) P63 protein P63 肿瘤抑制基因（抗原） OPG(Osteoprotegerin) 护骨素(多肽抗原) OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保护蛋白配体(抗原) P311 protein 增生性瘢痕相关蛋白（抗原） PARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二磷酸多聚酶抗原 Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 内脂素/内脏脂肪素（人：N端多肽）、内脏脂肪素、 又称：前B细胞克隆增强因子、内肥素、腹脂素 Visfatin-1 (PBEF1)(NT) hu、 mo、 rat、MK 内脂素/内脏脂肪素（人、大、小鼠、猴同源：N端多肽）、内脏脂肪素、前B细胞克隆增强因子、内肥素、腹脂素 Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、MK 内脂素/内脏脂肪素（抗人、大、小鼠、猴：N端多肽）前B细胞克隆增强因子、内肥素、腹脂素 PEDF (pigment epithelium-derived factor) 色素上皮源性因子(多肽抗原） PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 磷脂酸磷酸酶2C（抗原） PEPT1 (Peptide-transporters 1) 肠道肽转运蛋白(小肽转运蛋白)多肽 PTEN/MMAC1 一种肿瘤抑制基因抗原 小鼠成肌细胞；C2C12PIBF(progesterone induced blocking factor) 孕激素诱导阻断因子(抗原) PIWIL1(piwi-like 1) piwi 样1蛋白(抗原) PPAR Gamma (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma) 过氧化酶活化增生受体γ（抗原） PP2Ac 蛋白磷酸酶4(抗原) 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
