细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；Cytokeratin 5 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交，细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗，可用于基础研究和临床检验。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C10 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 氟磺胺草醚 标准品 ：72178-02-0 100mg 甲酰胺黄隆 标准品 ：173159-57-4 100MG 氯吡脲 标准品 ：68157-60-8 100mg 伐虫脒盐酸盐 标准品 ：23422-53-9 250mg 安果 标准品 ：2540-82-1 250mg Fosetyl-aluminum 标准品 ：39148-24-8 250mg Fosfomycin Calcium 标准品 ：25992-22-7 100mg 唑磷 标准品 ：98886-44-3 30mg 四氯苯酞标准品 ： 87-41-2 100mg 呋线威 标准品 ：65907-30-4 250mg Gentamycin-2,5-sulfate hydrate 标准品 ：1405-41-0 250mg 赤霉素 标准品 ：28281 100mg Gibberellin A3标准品 ： 28281 250mg 草胺磷铵盐 标准品 ：77182-82-2 250mg GLYCALPYRAMIDE标准品 ： 200mg 草甘膦标准品 ： 1071-83-6 250mg 苄螨醚 标准品 ：111872-58-3 100mg 常山酮乳酸盐 标准品 ：82186-71-8 1ml 氯吡嘧磺隆 标准品 ：100784-20-1 100mg 哈洛克酮 标准品 ：321-55-1 吡氟氯禾灵 标准品 ：69806-34-4 250mg 七氯 标准品 ：76-44-8 100mg 六氯苯 标准品 ：118-74-1 250mg 六那唑 标准品 ：79983-71-4 100mg 氟铃脲 标准品 ：86479-06-3 100mg 环嗪酮 标准品 ：51235-04-2 100mg 噻螨酮 标准品 ：78587-05-0 100mg 氟蚁腙 标准品 ：67485-29-4 100mg 磷化氢 标准品 ：7803-51-2 10G 恶霉灵 标准品 ：10004-44-1 20mg 烯菌灵标准品 ： 35554-44-0 100mg IMAZAMETHABENZ METHYL ESTER 标准品 ：81405-85-8 100mg 铵基咪草啶酸 标准品 ：114311-32-9 100mg Imazapic 标准品 ：104098-48-8 100mg 灭草烟 标准品 ：81334-34-1 100mg 灭草喹 标准品 ：81335-37-7 100mg nti-CHRNA7/FITC 荧光素标记烟碱型乙酰胆碱受体α7抗体IgG Anti-NADPH/FITC 荧光素标记抗NADPH氧化酶抗体IgG Anti-Nanog/FITC 荧光素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgG Anti-NAIF1 protein/FITC 荧光素标记核凋亡诱导因子蛋白1抗体IgG Anti-NAP1 /FITC 荧光素标记核小体组装蛋白1抗体IgG Anti-PNAT/NAT2/FITC 荧光素标记N-乙酰基转移酶2抗体IgG Anti-Natrexone/FITC 荧光素标记兔抗纳曲酮抗体IgG Anti-NB3/CNTN6/FITC 荧光素标记抗神经细胞NB3特定蛋白抗体IgG Anti-Contactin-6/mNB-3/FITC 荧光素标记NB-3神经粘附蛋白抗体IgG Anti-NBS1/FITC 荧光素标记DNA修复蛋白NBS1抗体IgG Anti-Phospho-p95/NBS1 (Ser343) /FITC 荧光素标记磷酸化DNA修复蛋白NBS1抗体IgG Anti-N-cadherin /FITC 荧光素标记N-钙粘附分子抗体IgG Anti-CD171/NCAM-L1/FITC 荧光素标记神经细胞粘附分子配体1抗体IgG Anti-CD172a/SIRP Alpha/FITC 荧光素标记信号调节蛋白α抗体IgG Anti-NCF/NCF4/p40phox/FITC 荧光素标记嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体IgG Anti-nck2/FITC 荧光素标记NCK衔接因子蛋白2抗体IgG Anti-NCOA2/KAT13C /FITC 荧光素标记核受体辅助激活蛋白2抗体IgG Anti-NCoR1 /FITC 荧光素标记核受体辅助抑制因子1抗体IgG Anti-NCoR2/FITC 荧光素标记核受体辅助抑制因子2抗体IgG Anti-NCX1/FITC 荧光素标记钠钙交换蛋白1抗体IgG Anti-NCX2/SLC8A2/FITC 荧光素标记钠钙交换蛋白2抗体IgG Anti-NCX3/FITC 荧光素标记钠钙交换蛋白3抗体IgG 小鼠杂交瘤细胞；Cytokeratin 5Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330)/FITC 荧光素标记磷酸化分化相关基因NDRG1抗体IgG Anti-Phospho-NDRG1 (Thr346)/FITC 荧光素标记磷酸化分化相关基因NDRG1抗体IgG Anti-NDRG2/FITC 荧光素标记抑癌基因NDRG2抗体IgG ABP抗体IgG 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
