细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;CK1 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C10 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 100mg 羟苯甲酯 供检查用 常温,避光 190008-201001 常温,避光 130100-200901 1ml 正丙醇 供残留溶剂检查用 常温,避光 130101-200901 1ml 异丙醇 供残留溶剂检查用 常温,避光 130102-200901 1ml 乙腈 供残留溶剂检查用 常温,避光 130103-200901 1ml 乙酸乙酯 供残留溶剂检查用 常温,避光 130104-200901 1ml 供残留溶剂检查用 常温,避光 130105-200901 1ml 乙醇 供残留溶剂检查用 2-8℃,避光 130106-200901 1ml 二氯甲烷 供残留溶剂检查用 常温,避光 130105-200901 1ml 苯 供残留溶剂检查用 常温,避光 130109-200901 1ml 吡啶 供残留溶剂检查用 常温,避光 130110-200901 1ml 二甲基亚砜 供残留溶剂检查用 2-8℃,避光 130106-200901 1ml 环己烷 供残留溶剂检查用 常温,避光 130113-200901 100mg 氯霉素 效价测定 2-8℃,避光 130303-200614 200mg 土霉素 效价测定 2-8℃,避光 130305-200720 200mg 四环素 效价测定 2-8℃,避光 130306-200918 200mg 红霉素 效价测定 2-8℃,避光 130307-200716 200mg 链霉素 效价测定 2-8℃,避光 130308-200713 200mg 新霉素 效价测定 2-8℃,避光 130309-200811 100mg 多粘菌素B 效价测定 2-8℃,避光 130313- 200mg 卡那霉素 效价测定 2-8℃,避光 130319-200710 100mg 杆菌肽 效价测定 2-8℃,避光 130320-200709 200mg 庆大霉素 效价测定 2-8℃,避光 130326-200314 200mg 粘菌素 效价测定 2-8℃,避光 130327-200305 200mg 利福霉素SV 效价测定 2-8℃,避光 130333-200907 200mg 阿米卡星 效价测定 2-8℃,避光 130335-200204 200mg 麦迪霉素 效价测定 2-8℃,避光 130337-9803 150mg 去甲万古霉素 效价测定 2-8℃,避光 130338-200303 200mg 卷曲霉素 效价测定 2-8℃,避光 130339-9802 Anti-L-Citrulline /FITC 荧光素标记抗L-瓜氨酸抗体IgG Anti-Lck/p56-LCK/FITC 荧光素标记淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶抗体IgG Anti-p90RSK/FITC 荧光素标记丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体IgG Anti-Phospho-Lck (Tyr505) /FITC 荧光素标记磷酸化淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶抗体IgG Anti-Rsk2/MAPKAP Kinase 1b/FITC 荧光素标记核糖体S6激酶RSK2抗体IgG Anti-Phospho-RSK2 (Ser227) /FITC 荧光素标记磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体IgG Anti-Phospho-RSK2 (Tyr529) /FITC 荧光素标记磷酸化核糖体S6激酶RSK2抗体IgG Anti-Phospho-RSK3 (Thr353/356) /FITC 荧光素标记磷酸化核糖体蛋白S6激酶家族RSK3抗体IgG Anti-RSK3/Ribosomal S6 kinase 3/FITC 荧光素标记核糖体蛋白S6激酶家族RSK3抗体IgG Anti-Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) /FITC 荧光素标记磷酸化核糖体蛋白S6激酶家族RSK3抗体IgG Anti-Phospho-p90RSK (Ser380) /FITC 荧光素标记磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体IgG Anti-Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363)/FITC 荧光素标记磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体IgG Anti-Phospho-p90RSK (Thr573)/FITC 荧光素标记磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体IgG Anti-LDH/FITC 荧光素标记抗乳酸脱氢酶抗体IgG Anti-LDL/FITC 荧光素标记低密度脂蛋白抗体IgG Anti-LDL-R/FITC 荧光素标记低密度脂蛋白受体抗体IgG 小鼠杂交瘤细胞;CK1Anti-Leptin/FITC 荧光素标记瘦素抗体IgG Anti-Leptin/FITC 荧光素FITC标记瘦素抗体IgG Anti-Leptin receptor/FITC 荧光素标记瘦素受体抗体IgG Anti-Leptin receptor(long) /FITC 荧光素标记 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |