细胞名称 小鼠胚胎内层细胞团；R1/E 形态特性 干细胞 生长特性 贴壁生长 特征特性 培养条件 传代方法 特殊培养基 传代情况11 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF "2-O-没食子酰基金丝桃苷 " 2-O-galloylhyperin "≥98% " 2-羟基泽兰内酯 2-Hydroxyeupatolide "≥97% " 3’-甲氧基-5’-羟基异黄酮-7- O-β-D-葡萄糖苷 3’-methoxy-5’-hydroxyisoflavone-7-O-β-D-glucoside 95% "4-羟基-L-异亮氨酸 " 4-Hydroxyisoleucine ≥98% ≥97% 4'-去甲基表鬼臼毒素 4'-Demethylepipodophyllotoxin "≥95% " 5-羟基色氨酸 5-HTP "≥98% " 7-木糖基-紫杉醇 "7-xylosyltaxol " "≥95% " 7-乙基-10-羟基喜树碱 7-Ethyl-10-Hydroxycamptothecin "≥98% " 7-乙基喜树碱 7-Ethylcamptothecin ≥98% 8-甲氧基补骨脂素 8-Methoxypsoralen "≥98% " 9-氨基喜树碱 9-Aminocamptothecin "≥98% " Alpha-细辛脑 Alpha-asarone "≥98% " β- 蜕皮甾酮 β-Ecdysone ≥99% "γ-日蟾毒配质 " γ-Bufotalin "≥98% " 阿马碱 Ajmalicine ≥98% 安格洛苷C Angoroside C "≥98% " 安石榴苷 Punicalagin ≥97% 巴卡丁III Baccatin III "≥98% " 白花丹醌 plumbapin 95% 白花丹素 plumbapin 95% 白花前胡丁素 Praeruptorin D "≥98% " 白花前胡素E Praeruptorin E "≥98% E2F1 转录因子E2F-1 E2F2 转录因子E2F-2抗原 E2F4 转录因子E2F-4抗原 E2F6 转录因子E2F-6抗原 E2 tag E2 tag多肽抗原 EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗原 EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear Anti-gens 3) EB病毒编码核蛋白-3(抗原) ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 内皮素转化酶1抗原 ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 内皮素转化酶2抗原 ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗原 ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚层发育不良抗原 rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重组人表皮生长因子 EGF(Epidermal growth factor)rat 重组表皮生长因子抗原(大鼠) EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 类表皮生长因子域7抗原 Egr-1(Early growth response 1) 早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗原 phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E（Ser209）抗原 小鼠胚胎内层细胞团；R1/EELK1 细胞转录因子ELK1抗原 Elastin 弹性蛋白抗原 ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原 Emp1 (epithelial membrane protein 1) 表皮膜蛋 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
