细胞名称 小鼠神经母细胞瘤细胞;Neuro-2a 形态特性 神经和阿米巴样干细胞 生长特性 贴壁生长 特征特性 克隆Neuro-2A是由R.J.Klebe和F.H.Ruddle经A株白鼠的自生肿瘤建立。 该细胞产生大量微管蛋白,此蛋白在神经细胞中起应答轴浆流动的收缩系统作用。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清,10% 传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况 P(180+5) 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 脱氢紫堇碱 Dehydrocorydalin "≥98% " "脱水羊藿素 " Anhydroicaritin "≥98% " "乌索酸 " Ursolic acid "≥98% " "五内脂 " Schisanlactone E "≥98% " 西贝碱 sipeimine ≥98% 西红花苷Ⅱ Crocin II "≥95% " "西瑞香素 " Dephnoretin "≥98% " 细辛脑 Asarone ≥98% 细辛醛 Asarylaldehyde "≥98% " "仙茅苷 " Curculigoside "≥98% " "相思豆碱 " Abrine "≥98% " "香草酸 " Vanillic acid "≥98% " "香兰素 " Vanillin "≥98% " "香叶木素 " Diosmetin "≥98% " "辛可尼丁 " Cinchonidine "≥98% " "辛可宁 " Cinchonine "≥98% " 雄烯二酮 Androstenedione "≥98% " 雪上一枝蒿乙素 Bullatine B "≥98% " "亚麻木酚素(SDG) " Lignans ≥97% 盐酸去氢骆驼蓬碱 Harmine. hydrochloride "≥98% " "盐酸水苏碱 " Stachydrine hydrochloride "≥98% " 盐酸小檗胺 Berbamine Hydrochloride ≥98% 盐酸依立替康 Irrotecan hydrochloride ≥99% "叶黄素 " Xanthophyll "≥90% " 乙酰蒲公英萜醇 Taraxeryl acetate ≥90% "乙酰紫草素 " Acetylshikonin "≥98% " 异佛手柑内酯 Isobergapten ≥98% 胰岛素样生长因子结合蛋白-2(多肽) IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3)C-term 胰岛素样生长因子结合蛋白-3抗原 IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原 IKB Beta (Inhibitor of KB) KB抑制蛋白β(多肽) IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原 IL-12(Interleukin-12) 白介素12抗原(白细胞介素-12) IL-12(Interleukin-12)human peptide 白介素12抗原(人) IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白细胞介素-12受体β2抗原 IL-13(Interleukin-13) 白介素13抗原 IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 IL-15(Interleukin-15) 白细胞介素-15抗原 IL-16(Interleukin-16) 白介素16抗原 IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白细胞介素-16抗原 IL-17(Interleukin-17) 白介素-17抗原 IL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人) IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白细胞介素-18/干扰素γ诱导因子 Anti-IL-18R alpha/CD218a 白细胞介素-18受体α链抗体 IL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受体抗原 小鼠神经母细胞瘤细胞;Neuro-2aIL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原 IL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠) IL-2 (Interleukin-2)Human IL-2抗原(人) IL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |