细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；HB L20 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 补骨脂甲素 Bavachin（补骨脂二氢黄酮） 97% 补骨脂乙素 Isobavachalcone（异补骨脂查尔酮） 97% 长春地辛 Vindesine 95% 川续断皂苷VI Akebia saponin D ≥98% 穿心莲内酯 Andrographolide ≥98% 穿心莲乙素 Andrographolide ≥98% 刺五加苷D Eleutheroside D ≥98.0% 德尔塔林 deltaline ≥97% 丁香醛 3,5-Dimethoxy-4-hydroxybenzaldehyde ≥97% 东莨菪内酯即东莨菪素 Gelseminic acid, Chrysatropic acid, 6-Methylesculetin 98% 东莨菪素 Scopoletin ≥98% 椴树苷 Tiliroside ≥98% 莪二酮 Curdione ≥98% 莪术二酮 Curdione ≥98% 杠柳毒苷 Periplocin ≥97% 高车前苷 Homoplantaginin >98% >94% 戈米辛G Gomisin G ≥97% 戈米辛J Gomisin J ≥94% 古伦宾 Columbin ≥95% 光翠雀碱 denudatine ≥95% 桂皮酸 Cinnamic acid 98% 肉桂酸 Cinnamic acid 98% 海柯皂苷元 hecogenin ≥95% 粉防己碱 d-Tetrandrine ≥98% 防己诺林碱 Hanfangchin B（Fangchinoline） ≥98% 2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 2,3,5,4'-tetera-hydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside ≥97% 槲皮素-3-O-葡萄糖苷 Isoquercitrin ≥98% 黄花菜木脂素A Cleomiscosin A ≥95% 黄芪皂苷-Ⅰ AstragalosideⅠ ≥98% 黄芪皂苷-Ⅱ Astragaloside -Ⅱ ≥98% 基因抗原 Matriptase 蛋白裂解酶（一种新的癌基因）抗原 HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene) 人巨细胞病毒UL49抗原 MC-1R (melanocortin-1-receptor) 黑皮质素-1受体抗原 Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide 髓样细胞白血病-1抗原 MDM2 (urine double minute 2) 双微体2癌基因抗原 MDR1(multidrug resistance 1) 多药耐药蛋白抗原 MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2) 肌细胞增强因子2抗原 Mfn1 (Mitofusin1) 线粒体融合蛋白1 MT(metallothionein) 金属硫蛋白抗原 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 层粘连蛋白受体1抗体 MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 层粘连蛋白受体1抗原（C端） MK(Midkine) 中期因子/肝素结合生长因子抗原 MLC/Myosin light chain 3 peptide 肌球蛋白轻链3抗原 MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬细胞移动抑制因子抗原 MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬细胞炎症因子1β 抗原 CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介素2受体β链抗原 小鼠杂交瘤细胞；HB L20MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬细胞炎症蛋白2抗原 MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基质金属蛋白酶13抗原 MMP-20(matrix metalloproteinase 20) 基质金属蛋白酶20抗原 MMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
