细胞名称 鼠B淋巴瘤细胞;6A8/6F10/1A6 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞由华中科技大学生命科学学院苏莉教授提交保藏,可用于相关的基础研究。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C10 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 65-85-0 苯甲酸标准品 Benzoic Acid 300mg 104-31-4 苯佐那酯标准品 Benzonatate 1g 106-51-4 1,4-苯醌标准品 1,4-Benzoquinone 200mg 121-30-2 苯并噻二嗪相关物质A标准品 100mg 5411-22-3 盐酸苄非他明标准品 200mg 132-17-2 甲磺酰苯扎托品标准品 Benztropine Mesylate 200mg 100-51-6 苯甲醇标准品 Benzyl Alcohol 500mg 120-51-4 苯甲酸苄酯标准品 Benzyl Benzoate 5g " 1-苄基-3-甲基-5-氨基吡唑盐酸盐标准品 " 25mg 3818-50-6 羟萘苄芬宁标准品 Bephenium Hydroxynaphthoate 500mg 633-65-8 盐酸黄连素标准品 Berberine Chloride 50mg beta-胡萝卜素标准品 ea 5579-84-0 盐酸倍他司汀标准品 Betahistine Hydrochloride 200mg 107-43-7 甜菜碱标准品 Betaine 1g 590-46-5 盐酸甜菜碱标准品 Betaine Hydrochloride 200mg 378-44-9 倍他米松标准品 Betamethasone 200mg 987-24-6 醋酸倍他米松标准品 Betamethasone Acetate 500mg 22298-29-9 苯甲酸倍他米松标准品 Betamethasone Benzoate 200mg 5593-20-4 丙酸倍他米松标准品 Betamethasone Dipropionate 125mg 151-73-5 倍他米松磷酸钠标准品 Betamethasone Sodium Phosphate 500mg 2152-44-5 戊酸倍他米松标准品 Betamethasone Valerate 200mg 2240-28-0 戊酸倍他米松相关物质A标准品 50mg 63659-19-8 盐酸倍他洛尔标准品 Betaxolol Hydrochloride 200mg 138-92-1 盐酸倍他唑标准品 Betazole Hydrochloride 200mg 590-63-6 氯贝胆碱标准品 Bethanechol Chloride 200mg 90357-06-5 比卡鲁胺标准品 Bicalutamide 200mg 比卡鲁胺相关物质A标准品 25mg 比卡鲁胺相关物质B标准品 10mg 越橘提取物标准品 Powdered Bilberry Extract 500mg 145-42-6 牛磺胆酸碱标准品 Bile Salts 10mg 生物活性测定阳性对照标准品 Positive Bioreaction 3 strips 58-85-5 生物素标准品 Biotin 200mg 514-65-8 比哌立登标准品 Biperiden 200mg TGF Beta 2 大鼠转化生长因子 β 2 TGF Beta 1 大鼠转化生长因子 β 1 EGF 大鼠表皮生长因子 EGFR 大鼠表皮生长因子受体 rat-VEGF/ELISA 大鼠血管内皮生长因子 human-VEGF-D 大鼠血管内皮生长因子D VEGF-R1 大鼠血管内皮生长因子受体1 VEGF-R2 大鼠血管内皮生长因子受体2 UPAR 大鼠尿激酶样纤溶酶原活化物受体 TH1/TH2 大鼠细胞内细胞因子 HLA-G 大鼠白细胞抗原G CTGF 大鼠结缔组织生长因子 MIP-1 Alpha 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α MIP-1 Gamma 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-1γ MIP-1 Beta 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-1β MIP-2 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-2 MIP-3 Alpha 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-3α MIP-3 Beta 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-3β MIP-4 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-4 MIP-5 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-5 MCP-1 大鼠巨噬细胞趋化蛋白-1 Ret MMP-9 大鼠血清金属基质蛋白酶-9 RANTES 大鼠趋化因子 E2(Ret) 大鼠雌二醇 G-CSF 大鼠粒细胞-集落刺激因子 GM-CSF 大鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 M-CSF 大鼠巨噬细胞-集落刺激因子 LIF 大鼠白血病抑制因子 鼠B淋巴瘤细胞;6A8/6F10/1A6IGF-1 大鼠胰岛素样生长因子-1 IGF- II 大鼠胰岛素样生长因子-Ⅱ ICAM- I 大鼠细胞间粘附因子-Ⅰ VCAM-1 大鼠血管内皮细胞间粘附因子-1 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |