细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;IL-10 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C6 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 100mg 540-10-3 棕榈酸棕榈酯标准品 Cetyl Palmitate 50mg 6004-24-6 西吡氯铵标准品 Cetylpyridinium Chloride 500mg 91722-47-3 牡荆树提取物标准品 Powdered Chaste Tree Extract 1.5g 56-75-7 氯霉素标准品 Chloramphenicol 200mg 530-43-8 氯霉素棕榈酸酯标准品 Chloramphenicol Palmitate 200mg 530-43-8 无味氯霉素A晶型标准品 200mg 530-43-8 氯霉素A多晶型标准品 100mg 58-25-3 氯氮草标准品 Chlordiazepoxide CIV 200mg 963-39-3 氯氮草相关物质A标准品 25mg 55-56-1 氯己定标准品 Chlorhexidine 200mg 56-95-1 醋酸氯己定标准品 Chlorhexidine Acetate 500mg 55-56-1 氯己定相关物质标准品 50mg 106-47-8 对氯苯胺标准品 P-Chloroaniline 200mg 6001-64-5 三氯叔丁醇标准品 Chlorobutanol 200mg 327-97-9 绿原酸标准品 Chlorogenic Acid 50mg 绿莲吉宁标准品 beta-Chlorogenin 20mg 氯甲基碳酸异丙酯标准品 100mg 50-63-5 磷酸氯喹标准品 Chloroquine Phosphate 500mg 86-98-6 氯喹相关物质A标准品 25mg 5270-74-6 氯噻酮相关物质A标准品 10mg 58-94-6 氯噻嗪标准品 Chlorothiazide 200mg 1988-4-6 氯二甲酚标准品 Chloroxylenol LISA Kit 人生长激素释放因子 MCF(Human macrophage chemotatic factor) ELISA Kit 人巨噬细胞趋化因子 IFN- Alpha/ BetaR(Human Interferon Alpha/ BetaReceptor) ELISA Kit 人α/β干扰素受体 BCGF(Human B cell growth protein) ELISA Kit 人B细胞生长因子 BCDF(Human B cell differetiation factor) ELISA Kit 人B细胞分化因子 Ep-CAM/CD362(Human Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人上皮细胞粘附分子 Sam(Human soluble adhesion molecules) ELISA Kit 人可溶性粘附分子 AmAC-1(Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1) ELISA Kit 人巨噬细胞替代激活相关化学因子1 VEGFR-2/sFLK-1(Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2) ELISA Kit 人可溶性血管内皮生长因子受体2 TSLP(Human thymic stromal lymphopoietin) ELISA Kit 人胸腺基质淋巴细胞生成素 PF/PFP(Human Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 人穿孔素/成孔蛋白 PTN(Human pleiotrophin) ELISA Kit 人多效生长因子 sCD28(human soluble cluster of differentiation 28) ELISA Kit 人可溶性CD28 Human lymphocyte factor ELISA Kit 人淋巴细胞因子 TARC/CCL17(Human thymus activation regulated chemokine) ELISA Kit 人胸腺活化调节趋化因子 NCAM-L1/CD171(Human Neural cell adhesion molecule ligand 1) ELISA Kit 人神经细胞粘附分子配体1 CVNPF(Human Cobra venom neuronal protective factor) ELISA Kit 人神经保护因子 sTNF AlphaR(Human soluble Tumor Necrosis Factor Alphareceptor) ELISA Kit 人可溶性肿瘤坏死因子α受体 小鼠杂交瘤细胞;IL-10sCKR(Human soluble cytokine receptor) ELISA Kit 人可溶性细胞因子受体 sFASL(Human soluble Factor-related Apoptosis ligand) ELISA Kit 人可溶性凋亡相关因子配体 IAP(Human inhibitor of apoptosis) ELISA Kit 人细胞凋亡抑制因子 CSF(Human colony-stimulating factor) ELISA 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |