细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；Human IgM 形态特性 上皮细胞样 生长特性 贴壁生长 特征特性 1957年，Puck TT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞，CHO-K1是CHO的一个亚克隆。CHO-K1的生长需要脯氨酸。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C8 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF yanidin Chloride 25mg 7084-24-4 矢车菊素-3-O-葡标准品 15mg 氰钴维生素标准品 ea 456-59-7 环扁桃酯标准品 Cyclandelate 200mg 303-25-3 盐酸苯甲嗪标准品 Cyclizine Hydrochloride 200mg 6202-23-9 盐酸环苯扎林标准品 Cyclobenzaprine Hydrochloride 200mg 10016-20-3 α-环糊精标准品 Alpha Cyclodextrin 500mg 7585-39-9 β-环糊精标准品 Beta Cyclodextrin 250mg 17465-86-0 γ-环糊精标准品 Gamma Cyclodextrin 200mg 100-49-2 环己甲醇标准品 Cyclohexylmethanol 1ml×2ampules 69430-24-6 环甲硅油 4标准品 Cyclomethicone 4 200mg 69430-24-6 环甲硅油 5标准品 Cyclomethicone 5 200mg 69430-24-6 环甲硅油 6标准品 Cyclomethicone 6 200mg 5870-29-1 盐酸环喷托酯标准品 Cyclopentolate Hydrochloride 300mg 821-48-7 环磷酰胺相关物质A标准品 25mg 158401-52-6 环磷酰胺相关物质B标准品 25mg 1071-28-9 环磷酰胺相关物质C标准品 25mg 158401-51-5 环磷酰胺相关物质D标准品 25mg 2-环丙甲基氨基-5-氯二苯甲酮标准品 50mg 68-41-7 环丝氨酸标准品 Cycloserine 250mg 59865-13-3 环孢菌素标准品 Cyclosporine 50mg 环孢菌素分离度用混合物标准品 25mg 2259-96-3 莰烯氯噻嗪标 ony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒细胞集落刺激因子 NAP-2/CXCL7(Human neutrophil activating protein-2) ELISA Kit 人中性粒细胞趋化蛋白2 Human fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 人趋化因子 bFGF-9(Human basic fibroblast growth factor 9) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子9 bFGF-6(Human basic fibroblast growth factor 6) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子6 bFGF-4(Human basic fibroblast growth factor 4) ELISA Kit 人碱性成纤维细胞生长因子4 aFGF-1(Human acidic fibroblast growth factor 1) ELISA Kit 人酸性成纤维细胞生长因子1 FASL(Human Factor-related Apoptosis ligand) ELISA Kit 人凋亡相关因子配体 FAS/CD95(Human Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 人凋亡相关因子 CD62E(Human E-Selectin) ELISA kit 人E选择素 CCL1(Human Eotaxin 1) ELISA Kit 人嗜酸粒细胞趋化蛋白 ECF(Human eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit 人鼠嗜酸粒细胞趋化因子 EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit 人内分泌腺来源的血管内皮生长因子 CNTF(Human Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 人睫状神经营养因子 CD30(Human Cluster of differentiation 30) ELISA Kit 人CD30分子 CXCR1(Human CXC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CXC趋化因子受体1 XCR1(Human XC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人XC趋化因子受体1 SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine) ELISA Kit 人二级淋巴组织趋化因子 小鼠杂交瘤细胞；Human IgME-Cad(Human E-Cadherin) ELISA Kit 人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白 BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人脑源性神经营养因子 ALCAM(Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人白细胞活化黏附因子 ACV-A(Human Activin A) ELISA Kit 人 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
