细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;HPRT 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 92-5 盐酸双环维林标准品 Dicyclomine Hydrochloride 125mg 69655-05-6 地丹诺辛标准品 Didanosine 200mg 地丹诺辛系统适用性合剂标准品 10mg 68-94-0 地丹诺辛相关物质A标准品 25mg 4097-22-7 地丹诺辛相关物质B标准品 25mg 84-17-3 双烯雌酚标准品 Dienestrol 125mg 111-42-2 二乙醇胺标准品 Diethanolamine 3ml 1642-54-2 枸橼酸乙胺嗪标准品 Diethylcarbamazine Citrate 200mg 111-46-6 二乙二醇标准品 Diethylene Glycol 0.5ml 84-66-2 酞酸二乙酯标准品 Diethyl Phthalate 200mg 134-80-5 安非拉酮盐酸盐标准品 200mg 110-40-7 癸二酸二乙酯标准品 Diethyl Sebacate 1ml 56-53-1 己烯雌酚标准品 Diethylstilbestrol 200mg 134-62-3 避蚊胺标准品 Diethyltoluamide 3g 33564-31-7 醋酸双氟拉松标准品 Diflorasone Diacetate 200mg 22494-42-4 二氟尼柳标准品 Diflunisal 200mg 8031-42-3 洋地黄标准品 Digitalis 3g 71-63-6 洋地黄毒甙标准品 Digitoxin 200mg 19408-84-5 二氢辣椒碱标准品 Dihydrocapsaicin 25mg 5965-13-9 酒石酸双氢可待因标准品 Dihydrocodeine Bitartrate CII 200mg 651-55-8 17- 雌二醇标准品 17alpha-Dihydroequilin 50mg 6190-39-2 甲磺酸二氢麦标准品 Dihydroergotamine Mesylate 500mg 5490-27-7 双氢链霉素标准品 Dihydrostreptomycin Sulfate 200mg 67-96-9 双氢速甾醇标准品 Dihydrotachysterol 30mg×4amplues 96-26-4 二羟基丙酮标准品 Dihydroxyacetone 250mg 3736-81-0 糠酸二氯尼特标准品 Diloxanide tin) ELISA Kit 人癌胚铁蛋白 SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit 人鳞状细胞癌相关抗原 TSA(Human tumor specific antigen) ELISA Kit 人肿瘤特异性抗原 MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) ELISA Kit 人黑色素瘤转移表面黏附分子 BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit 人乳癌易感蛋白2 ASK-1(Human apoptosis signal regulating kinase 1) ELISA Kit 人凋亡信号调节激酶I BAX(Human Bcl-2 associated X protein) ELISA Kit 人Bcl-2相关X蛋白 TF(Human Transfer factor) ELISA Kit 人转移因子 CCA(Human Colon Cancer Antigen) ELISA Kit 人结肠癌抗原 Human H-ras ELISA Kit 人H-ras Human c-sis ELISA Kit 人c-sis Human c-jun ELISA Kit 人c-jun Human c-fos ELISA Kit 人c-fos c-myc(Human c-myc Oncogene product) ELISA Kit 人c-myc癌基因产物 Smad1(Human Mothers against decapentaplegic homolog 1) ELISA Kit 人Smad1 Smad7(Human Mothers against decapentaplegic homolog 7) ELISA Kit 人Smad7 TAA(Human tumor-associated antigen) ELISA Kit 人肿瘤相关抗原 TIEG1(Human TGF-beta-inducible early response gene-1) ELISA Kit 人TGF-β诱导早期基因1 TAF(Human tumor angiogenesis factors) ELISA Kit 人肿瘤血管生长因子 CK-20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit 人细胞角蛋白20 小鼠杂交瘤细胞;HPRTCK-19(Human cytokeratin 19) ELISA Kit 人细胞角蛋白19 CK-18(Human cytokeratin 18) ELISA Kit 人细胞角蛋白18 CgA(Human Chromogranin) ELISA Kit 人嗜铬蛋白A pRB(Human retinoblastoma tumor sup 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |