细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;FER 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C10 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 250mg 106-14-9 12-羟基硬脂酸标准品 12-Hydroxystearic Acid 200mg 127-07-1 羟基脲标准品 Hydroxyurea 200mg 2192-20-3 盐酸羟嗪标准品 Hydroxyzine Hydrochloride 500mg 303-26-4 盐酸羟嗪相关物质A标准品 25mg 10246-75-0 双羟萘酸羟嗪标准品 Hydroxyzine Pamoate 500mg 天仙子胺相关物质A标准品 10mg 482-36-0 金丝桃甙标准品 Hyperoside 50mg 71138-97-1 醋酸琥珀羟丙甲纤维素标准品 Hypromellose Acetate Succinate 100mg 9050-31-1 邻苯二甲酸羟丙甲纤维素酯标准品 Hypromellose Phthalate 100mg 138926-19-9 伊班膦酸钠标准品 Ibandronate Sodium 100mg 625120-81-2 伊班膦酸相关物质A标准品 25mg 15687-27-1 布洛芬标准品 Ibuprofen 750mg 38861-78-8 布洛芬相关物质C标准品 0.2ml×3ampules 57852-57-0 盐酸依达比星标准品 Idarubicin Hydrochloride 50mg 54-42-2 品 苷标准品 Idoxuridine 250mg 3778-73-2 异环磷酰胺标准品 Ifosfamide 500mg 288-32-4 咪唑标准品 Imidazole 200mg 39236-46-9 双咪唑烷基脲标准品 Imidurea 200mg 494-19-9 亚氨基二苄标准品 Iminodibenzyl 25mg 74431-23-5 亚胺培南一水合物标准品 EPI(Human Epinephrine/Adrenaline) ELISA Kit 人肾上腺素 ER(Human Estradiol receptor) ELISA Kit 人雌二醇受体 PTHrP(Human Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit 人甲状旁腺激素相关蛋白 aGT(Human angiotensinogen) ELISA Kit 人血管紧张素原 Ang- I (Human angiotension I ) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅰ FS(Human Follistatin) ELISA Kit 人卵泡抑素 TAb(Human Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit 人甲状腺素抗体 CA(Human catecholamine) ELISA Kit 人儿茶酚胺 Cys-C(Human Cystatin C) ELISA Kit 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C AChRab(Human acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 人乙酰胆碱受体抗体 5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 人5羟色胺 INH-A(Human Inhibin) ELISA Kit 人抑制素A SHBG(Human sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 人性激素结合球蛋白 DHEA-S7(Human Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit 人脱氢表雄酮S7 DHEA(Human Dehydroepiandrosterone) ELISA Kit 人脱氢表雄酮 小鼠杂交瘤细胞;FERCGRP(Human calcitonin gene related peptide) ELISA Kit 人降钙素基因相关肽 SS(Human Somatostatin) ELISA Kit 人生长抑素 GHRP(Human Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 人生长激素释放多肽 INH-B(Human inhibin B) ELISA Kit 人 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |