细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;EphA1 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C10 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Menthyl Anthranilate 500mg 76-90-4 溴化甲哌佐酯标准品 Mepenzolate Bromide 200mg 1950-12-4 美芬妥因标准品 Mephenytoin 250mg 115-38-8 甲苯比妥标准品 Mephobarbital CIV 250mg 1722-62-9 盐酸甲哌卡因标准品 Mepivacaine Hydrochloride 200mg 1247-42-3 甲泼尼松标准品 Meprednisone 200mg 57-53-4 甲丙氨酯标准品 Meprobamate CIV 200mg 956-03-6 盐酸美普卡因标准品 Meprylcaine Hydrochloride 200mg " 3-巯基-2-甲丙酸1.2-二苯乙胺盐标准品 " 75mg 6112-76-1 巯基嘌呤标准品 Mercaptopurine 500mg 119478-56-7 美罗培南标准品 Meropenem 300mg 89-57-6 美沙拉嗪标准品 Mesalamine 200mg 美司那相关物质A标准品 50mg 美司那相关物质B标准品 50mg 32672-69-8 苯磺酸美索达嗪标准品 Mesoridazine Besylate 250mg 72-33-3 炔雌醇甲醚标准品 Mestranol 200mg 间甲酚 1ml 1115-70-4 盐酸二甲双胍标准品 Metformin Hydrochloride 200mg 461-58-5 盐酸二甲双胍相关物质A标准品 30mg 1396331 盐酸二甲双胍相关物质B标准品 Pase) ELISA Kit 人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶 FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit 人法尼基二磷酸法尼基转移酶1 D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人D-乳酸脱氢酶 Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰蛋白酶 KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽释放酶1 KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人激肽释放酶6 PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit 人磷酸化乙酰辅酶A 小鼠杂交瘤细胞;EphA1PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit 人磷酸甘油酸变位酶2 PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit 人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1 MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅰ转化酶 AP(Human Aprotinin) ELISA Kit 人抑肽酶 Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit 人胱天蛋白酶12 PKA(Human Protein kinase A) ELISA Kit 人蛋白激酶A ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit 人解整合素样金属蛋白酶10 MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶11 TS(Human thymidylate synthetase) ELISA Kit 人胸苷酸合成酶 TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶 PARP(Human Poly ADP ribose poly 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |