细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；HB L3-1-54 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C7 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF Milrinone 500mg 80047-24-1 米力农相关物质A标准品 50mg 8012-95-1 矿物油标准品 Mineral Oil 1．5ml 13614-98-7 盐酸二四环素标准品 Minocycline Hydrochloride 200mg 38304-91-5 敏诺西代标准品 Minoxidil 125mg 85650-52-8 米氮平标准品 Mirtazapine 350mg 61337-68-6 米氮平相关物质A标准品 15mg 米氮平混合物标准品 Mirtazapine Resolution Mixture 25mg 59122-46-2 米索前列醇标准品 Misoprostol 100mg 1950-7-7 丝裂霉素标准品 Mitomycin 50mg 53-19-0 米托担标准品 Mitotane 500mg 70476-82-3 盐酸米托蒽醌标准品 Mitoxantrone Hydrochloride 400mg 米托蒽醌标准品(系统适用性) 0.3mg 63547-24-0 莫达相关物质A标准品 Modafinil Related Compound A 20mg 118779-53-6 莫相关物质B标准品 Modafinil Related Compound B 20mg 68524-30-1 莫相关物质C标准品 Modafinil Related Compound C 20mg 574-42-5 莫达关物质D标准品 Modafinil Related Compound D 20mg 1726-02-9 莫相关物质E标准品 Modafinil Related Compound E 20mg 68693-11-8 莫标准品 Modafinil CIV 200mg 15622-65-8 盐酸吗茚酮标准品 Molindone Hydrochloride 500mg 83919-23-7 糖酸莫米松标准品 Mometasone Furoate 200mg 22373-78-0 莫能菌素钠盐标准品 Monensin Sodium 200mg 103-16-2 莫诺苯宗标准品 Monobenzone 200mg 141-43-5 乙醇胺标准品 Monoethanolamine 1ml 68990-53-4 单甘酯标准品 Monog se) ELISA Kit 人L-乳酸脱氢酶 ASM(Human acid sphingomyelinase) ELISA Kit 人酸性神经鞘磷脂酶 ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人花生四烯酸5脂加氧酶 5-LO/LOX(Human 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人5脂加氧酶 AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit 人腺苷酸环化酶1 sAC(Human Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit 人可溶性腺苷酸环化酶 ODC(Human Ornithine decarboxylase) ELISA Kit 人鸟氨酸脱羧酶 PTK/CD115(Human protein tyrosine kinase) ELISA Kit 人蛋白酪氨酸激酶 PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit 人蛋白酪氨酸磷酸酶 TACE(Human TNF Alpha converting enzyme) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子α转化酶 PMN Elastase(Human Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit 人多形核白细胞弹性蛋白酶 uPA/PLAU(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人尿激酶型纤溶酶原激活物 KLK 8(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人激肽释放酶8 KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人激肽释放酶6 小鼠杂交瘤细胞；HB L3-1-54FDA(Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase) ELISA Kit 人果糖1,6二磷酸醛缩酶 cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit 人组织蛋白酶D HSL(Human hormone sensitive lipase) ELISA Kit 人激素敏感性脂肪酶 PK(Human pancreatickininogenase) 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
