细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;HB 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C7 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF phine Hydrochloride CIII 250mg 465-65-6 纳洛酮标准品 Naloxone 125mg 16590-41-3 钠曲酮标准品 Naltrexone 200mg 131670-05-8 钠曲酮相关物质A标准品 30mg 434-22-0 诺龙标准品 Nandrolone CIII 50mg 360-70-3 癸酸诺龙标准品 Nandrolone Decanoate CIII 250mg 62-90-8 苯丙酸诺龙标准品 Nandrolone Phenpropionate CIII 250mg 550-99-2 盐酸萘甲唑啉标准品 Naphazoline Hydrochloride 200mg 91-20-3 萘标准品 Naphthalene 200mg 22204-53-1 萘普生标准品 Naproxen 200mg 26159-34-2 萘普生钠标准品 Naproxen Sodium 200mg 55134-13-9 甲基盐霉素标准品 Narasin 125mg 143388-64-1 盐酸那拉曲坦标准品 Naratriptan Hydrochloride 125mg 7681-93-8 纳他霉素标准品 Natamycin 200mg 105816-04-4 那格列奈标准品 Nateglinide 200mg 7077-5-6 那格列奈相关物质A标准品 Nateglinide Related Compound A 10mg 105816-05-5 那格列奈相关物质B标准品 10mg 105816-06-6 那格列奈相关物质C标准品 5mg 近红外系统适用性参考标准标准品 Near IR System Suitability ea 82752-99-6 萘法唑酮盐酸盐标准品 Nefazodone Hydrochloride 200mg 57059-62-8 萘法唑酮相关物质A标准品 Nefazodone Related Compound A 25mg 萘法唑酮相关物质B标准品 Nefazodone Related Compound B 25mg 甲磺酸奈非那韦标准品 200mg 新橙皮甙二氢查尔酮标准品 ea 114-80-7 溴化新斯的明标准品 Neostigmine Bro A2) ELISA Kit 人分泌型磷脂酶A2 E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit 人泛素连接酶 MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit 人肥大细胞类胰蛋白酶 DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit 人多巴色素异构酶 E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit 人泛素结合酶 PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit 人蛋白质二硫键异构酶 CAD(Human caspase activated deoxyribonuclease0 ELISA Kit 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶 Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶 E1/UBAE(Human E1/ubiquitin-activating enzyme) ELISA Kit 人泛素激活酶 PP(Human Pepsin) ELISA Kit 人胃蛋白酶 HK(Human Hexokinase) ELISA Kit 人己糖激酶 PDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit 人丙酮酸脱氢酶E1 GSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶 Casp-9(Human Caspase-9) ELISA Kit 人胱天蛋白酶9 Casp-3(Human Caspase 3) ELISA Kit 人胱天蛋白酶3 NE(Human neutrophil elastase) ELISA Kit 人中性粒细胞弹性蛋白酶 小鼠杂交瘤细胞;HBCA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit 人碳酸酐酶2 ADAM8(Human A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA Kit 人解整合素样金属蛋白酶8 MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit 人髓过氧化物酶 Gzms-B(Human granzymes B) ELISA K 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |