细胞名称 小鼠B淋巴细胞系;RMS-S-A 3101 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C9 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 165450-17-9 纽甜 51-98-9 炔诺酮醋酸酯标准品 Norethindrone Acetate 100mg 70458-96-7 氟诺沙星标准品 Norfloxacin 200mg 35189-28-7 诺孕酯标准品 Norgestimate 200mg 13732-69-9 诺孕酯相关物质A标准品 25mg 53016-31-2 去乙酰基诺孕酯标准品 Deacetylnorgestimate 25mg 6533-00-2 炔诺孕酮标准品 Norgestrel 125mg 盐酸去甲羟基标准品 50mg 15308-34-6 盐酸去甲苯福林标准品 Norphenylephrine Hydrochloride 25mg 894-71-3 去甲替林盐酸盐标准品 Nortriptyline Hydrochloride 200mg 128-62-1 那可丁标准品 Noscapine 500mg 303-81-1 新生霉素标准品 Novobiocin 200mg 849-55-8 盐酸布酚宁标准品 Nylidrin Hydrochloride 200mg 1400-61-9 制霉菌素标准品 200mg 6197-30-4 奥克立林标准品 Octocrylene 500mg 9002-93-1 辛苯聚糖标准品 Octoxynol 9 200ml 5333-42-6 辛基十二烷醇标准品 Octyldodecanol 200mg 5466-77-3 奥西诺酯标准品 500mg 118-60-5 水杨酸乙基己酯标准品 Octisalate (Octyl Salicylate) 400mg 82419-36-1 氧氟沙星标准品 Ofloxacin 200mg 82419-52-1 氧氟沙星相关物质A标准品 25mg 112-80-1 油酸标准品 Oleic Acid 1g 油酰聚氧甘油酯标准品 Oleoyl Polyoxylglycerides 100mg 3687-45-4 油酸油醇酯标准品 ELISA Kit 人基质金属蛋白酶4 MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶9/明胶酶B NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人神经特异性烯醇化酶 CK-MB(Human Creatine Kinase MB isoenzyme) ELISA Kit 人肌酸激酶同工酶MB PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 人前列腺酸性磷酸酶 PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人胃蛋白酶原C PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit 人胃蛋白酶原A PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA kit 人尿激酶型纤溶酶原激活物受体 uPA(Human urokinase plasminogen activator) ELISA kit 人尿激酶型纤溶酶原激活物 Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2 MMP-8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit 人基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶 (MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基质金属蛋白酶7 MMP-3(Human Matrix metalloproteinase 3) ELISA kit 人基质金属蛋白酶3 MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基质金属蛋白酶13 MMP-10(Human Matrix metalloproteinase 10) ELISA kit 人基质金属蛋白酶10 MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1) ELISA kit 人基质金属蛋白酶1 小鼠B淋巴细胞系;RMS-S-A 3101Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS样酪氨酸激酶3 Flt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS样酪氨酸激酶3配体 ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素转化酶 AMBP(Human alpha-1-microglobulin/ 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |