细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;HB RP12-2 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C9 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF TPH (Trptophan Hydroxylase) 色氨酸羟化酶(多肽) TP-5(Thymopentin 0.5mg 胸腺五肽 TP-5(Thymopentin) 胸腺五肽 TP I (topoisomerase I 0.5mg 拓普西异构酶Ⅰ抗原 TP I (topoisomerase I ) 拓普西异构酶Ⅰ抗原 TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha (DNA topoisomerase II Alpha 0.5mg DNA拓普西异构酶Ⅱ抗原 TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha (DNA topoisomerase II Alpha) DNA拓普西异构酶Ⅱ抗原 TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha 0.5mg TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha) 人肿瘤坏死因子-α(多肽抗原) TNF-alpha 肿瘤坏死因子-α抗原 0.5mg TNF-alpha 肿瘤坏死因子-α抗原 TNF-alpha 肿瘤坏死因子-α抗原 TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1 0.5mg 肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗原 TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗原 TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta 0.5mg 肿瘤坏死因子-β抗原 TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 肿瘤坏死因子-β抗原 Tn-C(Tenascin-C 0.5mg C端抗原 Tn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原 TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2 0.5mg TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 胶质细胞系源性神经营养因子(多肽) TM(Thrombomodulin 0.5mg 血栓调节蛋白多肽 TM(Thrombomodulin) 血栓调节蛋白多肽 TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5 0.5mg Toll样受体5抗原 TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5) Toll样受体5抗原 TLR4/CD284 (Toll-like receptor 4 0.5mg Toll样受体4抗原 TLR4/CD284 (Toll-like receptor 4) Toll样受体4抗原 TLR3 (Toll-like receptor 3 0.5mg Toll样受体3抗原 TLR3 (Toll-like receptor 3) Toll样受体3抗原 TIMP-4(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-4 0.5mg TIMP-4(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-4) 金属蛋白酶组织抑制因子-4(抗原) TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3 0.5mg TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 金属蛋白酶组织抑制因子(抗原) TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2 0.5mg TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金属蛋白酶组织抑制因子-2(抗原) TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1 0.5mg TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1) 金属蛋白酶组织抑制因子-1(抗原) TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator 0.5mg TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53诱导糖酵解和凋亡调节因子蛋白(抗原) TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1 0.5mg TGF-β诱导早期应答基因1抗原 TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1) TGF-β诱导早期应答基因1抗原 Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 0.5mg 上皮生长因子样域酪氨酸激酶2抗原 Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生长因子样域酪氨酸激酶2抗原 Tie1/JTK14 peptide 上皮生长因子样域酪氨酸激酶 ent binding protein,CREB ELISA Kit 人cAMP反应元件结合蛋白 Human Agrin ELISA Kit 人聚集蛋白 Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit 人Agouti相关蛋白 Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit 人膜辅蛋白 Human elongin A,EloA ELISA Kit 人延伸蛋白A Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit 人酰化刺激蛋白 Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit 人杀菌性/通透性增加蛋白 Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit 人细胞外基质磷酸糖蛋白 Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit 人复制蛋白A Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit 人软骨寡聚基质蛋白 Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit 人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白 Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit 人免疫抑制酸性蛋白 Human Gliadin IgA ELISA Kit 人麦角蛋白IgA Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人发动蛋白2 Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit 人着丝粒蛋白B Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit 人巨噬细胞刺激蛋白 Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白 Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit 人核基质蛋白22 Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit 人软骨寡聚蛋白 Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit 人多药耐药相关蛋白 小鼠杂交瘤细胞;HB RP12-2Human high mobility group protein 17,HMG-17 ELISA Kit 人高速泳动蛋白17 Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit 人空泡毒素相关蛋白A Human vitronectin,VNR ELISA Kit 人玻连蛋白/体外粘连蛋白 Human vimentin,VIM ELISA Kit 人波形蛋白 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |