细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;HB MO-5 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 0.5mg 细胞因子信号传导抑制蛋白3抗原 Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3) 细胞因子信号传导抑制蛋白3抗原 Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1 0.5mg Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 细胞激酶信号-1抑制剂(抗原) SNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25 0.5mg 突触相关膜蛋白25抗原 SNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25) 突触相关膜蛋白25抗原 Snake poison Protein 蛇毒蛋白 0.5mg Snake poison Protein 蛇毒蛋白 Snake poison Protein 蛇毒蛋白 Snake poison Protein 蛇毒蛋白 1mg Snake poison Protein 蛇毒蛋白 Snake poison Protein 蛇毒蛋白 Snail Snail蛋白抗原 0.5mg Snail Snail蛋白抗原 Snail Snail蛋白抗原 SMN1(survival of motor neuron 1 0.5mg 运动神经元生存蛋白1抗原 SMN1(survival of motor neuron 1) 运动神经元生存蛋白1抗原 SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain 0.5mg 心肌肌凝蛋白多肽 SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽 Smad7(Mothers against decapentaplegic homolog 7 0.5mg Smad7(Mothers against decapentaplegic homolog 7) Smad 7(多肽) Smad4(Mothers against decapentaplegic homolog 4 0.5mg Smad4抗原 Smad4(Mothers against decapentaplegic homolog 4) Smad4抗原 Smad2(Mothers against decapentaplegic homolog 2 0.5mg Smad2(Mothers against decapentaplegic homolog 2) Smad 2(抗原) Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase 0.5mg 线粒体促凋亡蛋白抗原 Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase) 线粒体促凋亡蛋白抗原 SLC6A4 (solute carrier family 6 0.5mg SLC6A4 (solute carrier family 6) 钾依赖钠钙交换蛋白6(抗原) Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7 0.5mg 碳酸氢钠协同转运蛋白4-A7抗原 Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7) 碳酸氢钠协同转运蛋白4-A7抗原 SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicarbonate cotransporter NBC1 0.5mg 碳酸氢钠协同转运蛋白4-A4 SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicarbonate cotransporter NBC1) 碳酸氢钠协同转运蛋白4-A4 SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2 0.5mg 磷酸钠协同转运蛋白抗原 SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 磷酸钠协同转运蛋白抗原 SLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1 0.5mg 乙酰辅酶A转运蛋白1抗原 SLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1) 乙酰辅酶A转运蛋白1抗原 SLC24A5 (solute carrier family 24, member 5 0.5mg SLC24A5 (solute carrier family 24, member 5) 可溶性载质转运蛋白SLC24A5(抗原) slc22A17 (solute carrier famili 22 0.5mg slc22A17 (solute carrier famili 22) 溶质转运蛋白家族22成员17(多肽抗原) Skp2 peptide 细胞S相激酶相关蛋白抗原 0.5mg Skp2 peptide 细胞S相激酶相关蛋白抗原 Skp2 peptide 细胞S相激酶相关蛋白抗原 SIRT1(sirtuin 1 0.5mg 沉默调节蛋白1抗原 SIRT1(sirtuin 1) 沉默调节蛋白1抗原 SIP1 peptide 运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗原 0.5mg PROGR ELISA kit 大鼠孕酮受体 IL-21 ELISA Kit 大鼠白介素21 D-LDH ELISA Kit 大鼠D-乳酸脱氢酶 TARC/CCL17 ELISA Kit 大鼠胸腺活化调节趋化因子 CH ELISA Kit 大鼠胆固醇 TG ELISA Kit 大鼠甘油三酯 TG ELISA Kit(human) 人甘油三酯 lipofuscin kit(human) 人脂褐素 LDL ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白 HDL ISA Kit 大鼠高密度脂蛋白 PGR ELISA Kit 大鼠孕酮受体 ACE II ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅱ转化酶 ACE I ELISA Kit 大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶 GnRHR ELISA Kit 大鼠促性腺激素释放激素受体 AMPK ELISA Kit 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 HSP47 ELISA Kit 大鼠热休克蛋白47 GC ELISA Kit 大鼠内源性糖皮质激素 CS ELISA Kit 大鼠柠檬酸合酶 L-LDH ELISA Kit 大鼠L-鼠乳酸脱氢酶 ACS ELISA Kit 大鼠脂酰辅酶A合成酶 CACT ELISA Kit 大鼠肉毒碱脂酰转移酶 小鼠杂交瘤细胞;HB MO-5pACCase ELISA Kit 大鼠磷酸化乙酰辅酶A羧化酶 MT ELISA Kit 大鼠金属硫蛋白 cTnT ELISA Kit 大鼠心肌特异性肌钙蛋白T AChE ELISA Kit 大鼠乙酰胆碱酯酶 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |