细胞名称 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;UK 1-6 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C3 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Secretin receptor 分泌素受体(抗原 0.5mg Secretin receptor 分泌素受体(抗原) Secretin 分泌素(抗原 0.5mg Secretin 分泌素(抗原) SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1 0.5mg SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1) 基质细胞衍生因子-1(抗原) SDF-1/CXCL12 基质细胞衍生因子1 0.5mg SDF-1/CXCL12 基质细胞衍生因子1 SDF-1/CXCL12 基质细胞衍生因子1 SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha 0.5mg 电压开启的钠离子通道SCN9A抗原 SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 电压开启的钠离子通道SCN9A抗原 SCF (Stem Cell Factor 0.5mg 干细胞生长因子抗原 SCF (Stem Cell Factor) 干细胞生长因子抗原 SCCA peptide 鳞状细胞癌抗原 0.5mg SCCA peptide 鳞状细胞癌抗原 SCCA peptide 鳞状细胞癌抗原 SATB1(special AT-rich sequence binding protein 0.5mg 核基质结合区结合蛋白1抗原 SATB1(special AT-rich sequence binding protein) 核基质结合区结合蛋白1抗原 SARS S-protein(抗原 0.5mg SARS S-protein(抗原) SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1 0.5mg SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原) SAP-1 (Synapse associated protein-I 0.5mg SAP-1 (Synapse associated protein-I) peptide 突触相关蛋白-1(多肽抗原) S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase 0.5mg 6-磷酸山梨醇脱氢酶抗原 S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-磷酸山梨醇脱氢酶抗原 S100B(S100 calcium binding protein B 0.5mg S100B蛋白多肽 S100B(S100 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S100B蛋白多肽 S100B S100B蛋白抗原 0.5ml S100B S100B蛋白抗原 S100B S100B蛋白抗原 S-100A1 (S100 calcium-binding protein A1 0.5mg 钙结合蛋白S100A1抗原 S-100A1 (S100 calcium-binding protein A1) 钙结合蛋白S100A1抗原 RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha 0.5mg 核受体RXRα抗原 RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受体RXRα抗原 Runx3 一种新发现的抑癌基因(抗原 0.5mg Runx3 一种新发现的抑癌基因(抗原) rSLT/SLT-IIe(O139 0.2mg 重组猪水肿素蛋白 rSLT/SLT-IIe(O139) 重组猪水肿素蛋白 RRAD (Ras-related associated with diabetes 0.5mg RRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原) ROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2 0.5mg Rho相关蛋白激酶2抗原 ROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2) Rho相关蛋白激酶2抗原 ROCK1 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 1 0.5mg Rho相关蛋白激酶1抗原 ROCK1 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 1) Rho相关蛋白激酶1抗原 RNF148(Ring finger protein 148 0.5mg 环指蛋白148抗原 RNF148(Ring finger protein 148) 环指蛋白148抗原 RKIP(Raf kinase inhibitor protein A Beta1-42 ELISA Kit 大鼠β淀粉样蛋白1-42 CD44 ELISA Kit 大鼠CD44分子 8-OHdG ELISA Kit 大鼠8羟基脱氧鸟苷 IL1Ra ELISA Kit 大鼠白介素1受体拮抗剂 IAA ELISA Kit 大鼠胰岛素自身抗体 gp210 ELISA Kit 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体 sTLR6 ELISA Kit 大鼠可溶性Toll样受体6 sTLR2 ELISA Kit 大鼠可溶性Toll样受体2 PGF2 Alpha ELISA Kit 大鼠前列腺素F2α LTE4 ELISA Kit 大鼠白三烯E4 UK ELISA Kit 大鼠尿激酶 F XII ELISA Kit 大鼠凝血因子Ⅻ F X III ELISA Kit 大鼠凝血因子ⅩⅢ F III ELISA Kit 大鼠凝血因子Ⅲ Apo-H ELISA Kit 大鼠载脂蛋白H IL-2R ELISA Kit 大鼠白介素2受体 ADM ELISA Kit 大鼠肾上腺髓质素 Beta-EPR ELISA Kit 大鼠β内啡肽受体 CAMK 2 ELISA Kit 大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2 HL ELISA Kit 大鼠肝脂酶 N-AChR ELISA Kit 大鼠烟碱型乙酰胆碱受体 M-AChR ELISA Kit 大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体 APC ELISA Kit 大鼠活化蛋白C GAL ELISA Kit 大鼠甘丙肽/甘丙素 a-Glu ELISA Kit 大鼠α葡萄糖苷酶 ODF ELISA Kit 大鼠破骨细胞分化因子 TLR-9/CD289 ELISA kit 大鼠Toll样受体9 Lep IgG ISA Kit 大鼠钩端螺旋体IgG HSF1 ELISA Kit 大鼠热休克因子1 BetaOHB ELISA Kit 大鼠β羟丁酸 CYP450 ELISA Kit 大鼠细胞色素P450 GHRP-Ghrelin ELISA Kit 大鼠生长激素释放肽ghrelin 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;UK 1-6vaspin ELASA Kit 大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂 BrdU ELISA Kit 大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶 TGF Beta2 ELISA Kit 大鼠转化生长因子β2 CYP2E1 ISA Kit 大鼠细胞色素P4502E1 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |