细胞名称 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;FU 2-16 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C10 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 0.5mg Raf激酶抑制蛋白抗原 RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激酶抑制蛋白抗原 rh-VEGF(GST Tag 0.1mg 重组人血管内皮细胞生长因子 rh-VEGF(GST Tag)(Recombinant Vascuoar endothelial growth factor) 重组人血管内皮细胞生长因子 rh-TNF-Alpha(rh-Tumor Necrosis Factor alpha 100ug 重组人肿瘤坏死因子 rh-TNF-Alpha(rh-Tumor Necrosis Factor alpha) 重组人肿瘤坏死因子 rh-TNF alpha protein GST Tagged 重组人肿瘤坏死因子 100ug rh-TNF alpha protein GST Tagged 重组人肿瘤坏死因子 rh-TNF alpha protein GST Tagged 重组人肿瘤坏死因子 RhoA (RhoA protein 0.5mg RhoA抗原 RhoA (RhoA protein) RhoA抗原 Rho C(Ras homolog gene family member C 0.5mg RhoC抗原 Rho C(Ras homolog gene family member C) RhoC抗原 rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag 100ug 重组人白介素-1受体拮抗剂 rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag) 重组人白介素-1受体拮抗剂 rhEGF(rh-Epidermal growth factor 100ug 重组人表皮生长因子 rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重组人表皮生长因子 rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mg 重组人表皮生长因子 rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor) 重组人表皮生长因子 rHBsAg 重组乙肝病毒表面抗原 100ug rHBsAg 重组乙肝病毒表面抗原 rHBsAg 重组乙肝病毒表面抗原 rh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7 100ug 重组人骨形态发生蛋白7 rh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7) 重组人骨形态发生蛋白7 rhBMP-2/BMP2 重组人骨形态发生蛋白-2 100ug rhBMP-2/BMP2 重组人骨形态发生蛋白-2 rhBMP-2/BMP2 重组人骨形态发生蛋白-2 rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein 100ug 重组乙肝病毒e抗原 rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 重组乙肝病毒e抗原 rHBcAg 重组乙肝病毒核心抗原 100ug rHBcAg 重组乙肝病毒核心抗原 rHBcAg 重组乙肝病毒核心抗原 r-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents 0.1mg 重组谷胱甘肽转移酶GST标签蛋白 r-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents) 重组谷胱甘肽转移酶GST标签蛋白 RGS2 peptide G蛋白信号转导调节因子2抗原 0.5mg RGS2 peptide G蛋白信号转导调节因子2抗原 RGS2 peptide G蛋白信号转导调节因子2抗原 Resistin 抵抗素抗原 0.5mg Resistin 抵抗素抗原 Resistin 抵抗素抗原 reMOG 1-125 protein 重组髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白1-125 500ug reMOG 1-125 protein 重组髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白1-125 reMOG 1-125 protein 重组髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白1-125 Recombinant EGFP protein 重组增强型绿色荧光 100ug Recombinant EGFP protein 重组增强型绿色荧光 Recombinant EGFP protein 重组增强型绿色荧光 rDen-2(rh-Dengue Virus 100ug 重组人登革热病毒2型诊断抗原 rDen-2(rh-Dengue Virus) 重组人登革热病毒2型诊断抗原 rDen(rh-Dengue Virus 100ug Alpha1-MG ELISA Kit 大鼠α1微球蛋白 MCP-4/CCL13 ELISA Kit 大鼠单核细胞趋化蛋白4 PPAR- Alpha ELISA Kit 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α CAM ELISA Kit 大鼠钙调素 Apo-E ELISA Kit 大鼠载脂蛋白E omentin ELISA Kit 大鼠网膜素 OFQ/N ELISA Kit 大鼠孤腓肽 PP ELISA Kit 大鼠蛋白磷酸酶 TrxR ELISA Kit 大鼠硫氧还蛋白还原酶 Trx ELISA Kit 大鼠硫氧化还原蛋白 Collagenase II ELISA Kit 大鼠胶原酶II TREM-1 ELISA Kit 大鼠髓系细胞触发受体-1 Collagenase I ELISA Kit 大鼠胶原酶I P-PKC ELISA Kit 大鼠磷酸化蛋白激酶C pERK ELISA Kit 大鼠磷酸化细胞外信号调节激酶 cath-K ELISA Kit 大鼠组织蛋白酶K AmAC-1 ELISA Kit 大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1 BMPs ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白 RBP-4 ELISA Kit 大鼠视黄醇结合蛋白4 6-keto-PGF1a ELISA Kit 大鼠6酮前列腺素F1a Pentosidine ELISA Kit 大鼠戊糖素 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;FU 2-16AGEs ELISA Kit 大鼠晚期糖基化终末产物 NGAL ELISA Kit 大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 Hp-IgG ELISA Kit 大鼠幽门螺旋菌IgG ER ELISA Kit 大鼠雌激素受体 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |