细胞名称 抗补体因子小鼠杂交瘤细胞；14D3 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 可产生单克隆抗体，抗原为补体I因子。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 保持细胞密度在1×105～1×106 cells/ml之间，每周换液2～3次 传代情况 不详 冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR - 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 抗原 phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 磷酸化氨基末端激酶1/2/3（pJNK1/2/3）抗原 phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24 0.5mg phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24)(fruit fly) 异染色质蛋白1(磷酸化多肽) phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41 0.5mg phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide 异染色质蛋白1（磷酸化多肽） phospho-GSK-3 Beta(pSer9 0.5mg 磷酸化葡萄糖合成激酶-3β抗原 phospho-GSK-3 Beta(pSer9) 磷酸化葡萄糖合成激酶-3β抗原 phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta 0.5mg 磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗原 phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗原 phospho-FAK(pTyr577 0.5mg 磷酸化粘着斑激酶抗原 phospho-FAK(pTyr577) 磷酸化粘着斑激酶抗原 phospho-FAK(pSer732 0.5mg 磷酸化粘着斑激酶抗原 phospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 磷酸化粘着斑激酶抗原 phospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185 0.5mg 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗原 phospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗原 phospho-eIF4E(pSer209 0.5mg 抗原 phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E（Ser209）抗原 phospho-CREB-1 磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白（多肽 0.1mg phospho-CREB-1 磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白（多肽） phospho-BAD(pSer128 0.5mg 磷酸化相关死亡促进因子抗体 phospho-BAD(pSer128) 磷酸化相关死亡促进因子抗体 phospho-ATF2(pSer490/pSer498 0.5mg 磷酸化活化复制因子2抗原 phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 磷酸化活化复制因子2抗原 phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580 0.5mg phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受体（多肽） phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198 1mg peptide 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗原 phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗原 phospho-AMPK alpha 1(Thr172 1mg peptaide 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗原 phospho-AMPK alpha 1(Thr172) peptaide 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗原 phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473 扰素诱导蛋白16/p16 SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit 大鼠基质细胞衍生因子1a GMP-140 ELISA Kit 大鼠血浆α颗粒膜蛋白 MPO ELISA Kit 大鼠髓过氧化物酶 Gzms-B ELISA Kit 大鼠颗粒酶B Gzms-A ELISA Kit 大鼠颗粒酶A Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit 大鼠淋巴细胞趋化因子 TCC C5b-9 ELISA Kit 大鼠末端补体复合物C5b-9 C4 ELISA Kit 大鼠补体蛋白4 Renin ELISA Kit 大鼠肾素 ANX- V ELISA Kit 大鼠膜联蛋白Ⅴ AECA ELISA Kit 大鼠抗内皮细胞抗体 i-PTH ELISA Kit 大鼠全段甲状旁腺素 CIAP ELISA Kit 大鼠牛小肠碱性磷酸酶 SP-A ELISA Kit 大鼠肺表面活性物质相关蛋白A CC16 ELISA Kit 大鼠克拉拉细胞蛋白 抗补体因子小鼠杂交瘤细胞；14D3EPI ELISA Kit 大鼠肾上腺素 MPO-ANCA IgG ELISA Kit 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG C3 ELISA Kit 大鼠补体蛋白3 AZT ELISA Kit 大鼠叠 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
