细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;HB BrE-1 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C7 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 0.5mg peptide 白介素-1受体拮抗剂抗原 IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide 白介素-1受体拮抗剂抗原 IL-18/IGIF(Interleukin-18 0.5mg 白细胞介素-18/干扰素γ诱导因子 IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白细胞介素-18/干扰素γ诱导因子 IL-17(Interleukin-17 0.5mg IL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人) IL-17(Interleukin-17 0.5mg 白介素-17抗原 IL-17(Interleukin-17) 白介素-17抗原 IL-16/LCF(interleukin-16 0.5mg 白细胞介素-16抗原 IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白细胞介素-16抗原 IL-16(Interleukin-16 0.5mg 白介素16抗原 IL-16(Interleukin-16) 白介素16抗原 IL-15(Interleukin-15 0.5mg 白细胞介素-15抗原 IL-15(Interleukin-15) 白细胞介素-15抗原 IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mg IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 IL-13(Interleukin-13 0.5mg 白介素13抗原 IL-13(Interleukin-13) 白介素13抗原 IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白细胞介素-12受体β2抗原 0.5mg IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白细胞介素-12受体β2抗原 IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白细胞介素-12受体β2抗原 IL-12(Interleukin-12 0.5mg IL-12(Interleukin-12)human peptide 白介素12抗原(人) IL-12(Interleukin-12 0.5mg IL-12(Interleukin-12) 白介素12抗原(白细胞介素-12) IL-10(Interleukin-10 0.5mg IL-10(Interleukin-10) 白介素10(白细胞介素-10)(抗原) IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mg IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白细胞介素-1β)(多肽抗原) IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha 0.5mg 白介素1α抗原 IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原 IKI3 family protein 0.5mg IKI3 family protein IKI3 family protein IKB Beta (Inhibitor of KB 0.5mg IKB Beta (Inhibitor of KB) KB抑制蛋白β(多肽) IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha 0.5mg KB抑制蛋白α抗原 IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原 IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mg 胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原 IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰岛素样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原 IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II 0.5mg IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰岛素样生长因子-II(抗原) IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I 0.5mg IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰岛素样生长因子-I(抗原) IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5 0.5mg IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5) 胰岛素样生长因子结合蛋白-5(抗原) IGFBP-3 (Insulin-like Growth Fa 皮质激素(7-23)抗体IgG ACTH(18-39)/FITC 荧光素标记ACTH(18-39)抗体IgG Anti-Actin Alpha /Alpha-SMA/FITC 荧光素标记Actin α 蛋白抗体IgG Anti-Actin Alpha / Alpha-SMA/RBITC 红色荧光素标记肌动蛋白α抗体IgG Anti- Beta-Actin/FITC 荧光素标记β-肌动蛋白抗体IgG Anti-F-Actin/FITC 荧光素标记抗F-肌动蛋白抗体 Anti- Alpha-ACTN4/FITC 荧光素标记抗α-辅肌动蛋白4抗体IgG Anti-ADAM-TS1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型抗体IgG Anti-ADAM10/MADM/CD156c/FITC 荧光素标记去整合素样金属蛋白酶10抗体IgG Anti-ADAM-TS7/FITC 荧光素标记整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体IgG Anti-14-3-3 family protein/FITC 荧光素标记植物14-3-3蛋白抗体IgG Anti-ADAM-TS7/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7(N端)抗体IgG Anti-ADAM-TS12/FITC 荧光素标记整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体IgG Anti-ACV-A/FITC 荧光素标记活化素A抗体IgG Anti-Adducin protein/FITC 荧光素标记内收蛋白抗体IgG Anti-Adenosine A2A-R/FITC 荧光素标记腺苷A2A受体抗体IgG Anti-ADFP/ADRP/adipophilin/FITC 荧光素标记脂肪组织分化相关蛋白抗体IgG Anti-DRP3/FITC 荧光素标记Dystrobrevin α蛋白抗体IgG 小鼠杂交瘤细胞;HB BrE-1Anti-ADH/AVP/FITC 荧光素标记抗利尿激素/血管升压素抗体IgG Anti-Adipo R1/FITC 荧光素标记脂联素受体-1蛋白抗体IgG Anti-Adipo R2 /FITC 荧光素标记脂联素受体-2抗体IgG Anti-Adiponectin/FITC 荧光素标记脂联素 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |