细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;HB BFR 87-70 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 0.5mg 热休克蛋白90α抗体 HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 热休克蛋白90α抗体 HSP-70 peptide 热休克蛋白-70(多肽抗原 0.5mg HSP-70 peptide 热休克蛋白-70(多肽抗原) HSP-60( Heat shock protein-60 0.5mg HSP-60( Heat shock protein-60) 热休克蛋白-60(抗原) HSP47(Heat shock protein-47 0.5mg 热休克蛋白-47抗原 HSP47(Heat shock protein-47) 热休克蛋白-47抗原 HSP-27(Heat Shock Protein 27 0.5mg HSP-27(Heat Shock Protein 27) 热休克蛋白-27(抗原) HSP-105 (heat sock protein-105 0.5mg 热休克蛋白HSP105抗原 HSP-105 (heat sock protein-105) 热休克蛋白HSP105抗原 HSL(hormone-sensitive lipase 0.5mg HSL(hormone-sensitive lipase) 荷尔蒙敏感脂肪酸(抗原) HSA/human Serum albumin 人血清白蛋白 10mg HSA/human Serum albumin 人血清白蛋白 HSA/human Serum albumin 人血清白蛋白 Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3 0.5mg HRAS样抑制因子3抗原 Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS样抑制因子3抗原 H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原 0.5mg H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原 H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原 HPV18 E6 人类状瘤病毒18E6 0.5mg HPV18 E6 人类乳状瘤病毒18E6 HPV18 E6 人类状瘤病毒18E6 HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mg 人类状瘤病毒16抗原 HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人类瘤病毒16抗原 HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16 0.5mg 人类状瘤病毒16抗原 HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人类病毒16抗原 Hpt/HP(haptoglobin 0.5mg 结合珠蛋白/触珠蛋白抗原 Hpt/HP(haptoglobin) 结合珠蛋白/触珠蛋白抗原 HO-2(Heme oxygenase 2 0.5mg 血红素氧合酶-2抗原 HO-2(Heme oxygenase 2) 血红素氧合酶-2抗原 HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1 0.5mg 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原 HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原 HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1 0.5mg 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原 HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原 HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1 0.5mg HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高迁移率族蛋白-1(抗原) HMGA2 (high mobility group A2 0.5mg 高迁移率族蛋白A2抗原 HMGA2 (high mobility group A2) 高迁移率族蛋白A2抗原 HLA-E 人类白细胞抗原E 0.5mg HLA-E 人类白细胞抗原E HLA-E 人类白细胞抗原E HLA-DR(human leukoyte Antigen DR 0.5mg HLA-DR抗原 HLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原 HIV-1(human immunodeficiency virus type 1 0.5mg HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人类免疫缺陷病毒1型(抗原) HIV-1(human immunodeficiency virus type 1 0.5mg HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人类免疫缺陷病毒1型(抗原) HIV gp120 艾滋病病毒(抗原 0.5mg 基化终末产物特异性受体抗体IgG Anti-AGEs/FITC 荧光素标记晚期糖基化终末产物抗体IgG Anti-AGER/RAGE/Cy3 荧光素Cy3标记晚期糖基化终末产物特异性受体抗体IgG Anti-Aggrecan/FITC 荧光素标记软骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗体IgG Anti-Aggrecan2/ADAMTS-5/FITC 荧光素标记软骨蛋白聚糖抗体IgG Anti-Agrin/FITC 荧光素标记聚集蛋白抗体IgG Anti-Agtr1/AT1a/FITC 荧光素标记血管组织血管紧张素Ⅱ1型受体抗体IgG Anti-AGER/Gold 金离子标记的晚期糖基化终末产物特异性受体抗体 Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 荧光素标记芳香烃受体抗体IgG Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 荧光素标记芳香烃受体抗体IgG Anti-AIF/FITC 荧光素标记Anti-AIF抗体IgG Anti-AIF/FITC 荧光素标记调亡诱导因子抗体IgG Anti-A/H1N1-M2 Human/Gold 胶体金标记兔抗人A型流感病毒H1N1-M2抗体IgG Anti-A/H1N1-M2 Human/Gold 胶体金标记兔抗人A型流感病毒H1N1-M2抗体IgG Anti-AIMP2/JTV1/FITC 荧光素标记抗AIMP2抗体IgG Anti-AK-1/FITC 荧光素标记腺苷酸激酶-1抗体IgG Anti-ADK/adenylate kinase/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠腺苷酸激酶抗体IgG 小鼠杂交瘤细胞;HB BFR 87-70Anti-AKAP95/AKAP8 /FITC 荧光素标记蛋白激酶A锚定蛋白95抗体IgG Anti-AKT2/FITC 荧光素标记蛋白激酶B2抗体IgG Anti-phospho-Akt/FITC 荧光素标记抗磷酸化蛋白激酶B抗体IgG Anti-CEA/Gold 胶体金标记癌胚抗原 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |