细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；DV2-M6 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 0.5mg Endothelin-1 内皮素-1(多肽抗原) Endostatin 内皮抑素/内皮他丁抗原 0.5mg Endostatin 内皮抑素/内皮他丁抗原 Endostatin 内皮抑素/内皮他丁抗原 Emp1 (epithelial membrane protein 1 0.5ml 表皮膜蛋白1抗原 Emp1 (epithelial membrane protein 1) 表皮膜蛋白1抗原 ELK1 细胞转录因子ELK1抗原 0.5mg ELK1 细胞转录因子ELK1抗原 ELK1 细胞转录因子ELK1抗原 ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原 0.5mg ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原 ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原 Elastin 弹性蛋白抗原 0.5mg Elastin 弹性蛋白抗原 Elastin 弹性蛋白抗原 Egr-1(Early growth response 1 0.5mg 早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗原 Egr-1(Early growth response 1) 早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗原 EGFRvIII 表皮生长因子受体III型突变体抗原 0.5mg EGFRvIII 表皮生长因子受体III型突变体抗原 EGFRvIII 表皮生长因子受体III型突变体抗原 EGFR- V III 人表皮生长因子受体-8（多肽片断抗原 0.5mg EGFR- V III 人表皮生长因子受体-8（多肽片断抗原） EGF-R (Epidemal growth factor receptor 0.5mg EGF-R (Epidemal growth factor receptor) 表皮生长因子受体（抗原） EGFL7(EGF-like domain containing protein 7 0.5mg 类表皮生长因子域7抗原 EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 类表皮生长因子域7抗原 EGF(Epidermal growth factor 0.5mg EGF(Epidermal growth factor)rat 重组表皮生长因子抗原(大鼠) ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1 0.5mg 外胚层发育不良抗原 ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚层发育不良抗原 ECP(eosinophil cationic protein 0.5mg mouse rat 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗原 ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗原 ECG2 (sophagus cancer-related gene-2 0.5mg ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相关基因（抗原） ECG2 (sophagus cancer-related gene-2 0.5mg ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相关基因（抗原） ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2 0.5mg 内皮素转化酶2抗原 ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 内皮素转化酶2抗原 ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1 0.5mg 内皮素转化酶1抗原 ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 内皮素转化酶1抗原 E-cadherin E-钙粘附分子抗原 0.5mg E-cadherin E-钙粘附分子抗原 E-cadherin E-钙粘附分子抗原 EBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3 0.5mg EB病毒编码核蛋白-3 EBNA-3 (Epstein barr nuclear antigens 3) EB病毒编码核蛋白-3 EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3 0.5mg 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗原 EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗原 E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16 0.5mg 人瘤病毒16型E7蛋白抗原 E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人瘤病毒16型E7蛋白抗原 E2F6 转录因子E2F-6抗原 0.5mg E2F6 转录因 素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞死亡调解子抗体IgG Anti-Bim(phospho Ser87)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞死亡调解子抗体IgG Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化细胞死亡调解子抗体IgG Anti-BIRC5/FITC 荧光素标记细胞凋亡抑制因子5抗体IgG Anti-CD203c/FITC 荧光素标记CD203c抗体IgG Anti-CD203c/RBITC 红色荧光素罗丹明(RBITC)标记抗CD203c抗体IgG Anti-BNP/HRP 辣根过氧化物酶标记兔抗人脑钠素抗体IgG Anti-CD31/HRP 辣根过氧化物酶标记CD31抗体IgG Anti-BK channel/FITC 荧光素标记BK通道蛋白抗体IgG Anti-BKCa channels/FITC 荧光素标记钙激活钾通道蛋白抗体IgG Anti-Bmi1/PCGF4/FITC 荧光素标记组蛋白相关Bmi1抗体IgG Anti-BLAME/SLAMF8/FITC 荧光素标记BLAME抗体IgG Anti-BLNK/B-cell linker protein /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠T淋巴细胞连接蛋白抗体IgG Anti-Phospho-BLNK(p-Tyr96) /FITC 荧光素标记兔抗人磷酸化T淋巴细胞连接蛋白抗体IgG Anti-BMP2/FITC 荧光素标记骨形态发生蛋白-2抗体IgG Anti-BMP4/FITC 荧光素标记骨形态发生蛋白4抗体IgG Anti-BMP6/FITC 荧光素标记骨形态发生蛋白6抗体IgG Anti-BMP-7/FITC 荧光素标记骨形态发生蛋白-7抗体IgG Anti-BMP8/FITC 荧光素标记骨形态发生蛋白8抗体IgG Anti-BMPR-1A/FITC 荧光素标记骨成型蛋白受体1A抗体IgG 小鼠杂交瘤细胞；DV2-M6Anti-BNP/FITC 荧光素标记脑钠素抗体IgG Anti-BNP/FITC 荧光素标记脑钠素抗体IgG Anti-BRN3A /FITC 荧光素标记转录因子Brn3蛋白抗体IgG Anti-BOb-1/FITC 荧光素标记B细胞特异性转录 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
