细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；3F16A4 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF Alpha/ Beta 0.5mg 末梢同源匡基因多肽片段 DLX4 (Dsital-less homebox4 isoformAlpha/ Beta) 末梢同源匡基因多肽片段 DKK1(Dickkopf 1 0.5mg 抑癌蛋白DKK1抗原 DKK1(Dickkopf 1) 抑癌蛋白DKK1抗原 DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mg DISC1 N端抗原 DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原 DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mg DISC1 C端抗原 DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原 DHAV(duck hepatitis A virus 0.5mg 鸭甲型肝炎A病毒抗原 DHAV(duck hepatitis A virus) 鸭甲型肝炎A病毒抗原 Des(Desmin 0.5mg 结蛋白抗原 Des(Desmin) 结蛋白抗原 Deltex-1 (DTX1 0.5mg 抗原 Deltex-1 (DTX1) (Deltex protein 1)抗原 Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat 0.5mg Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) 防御素β2抗原（大鼠） Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse 0.5mg Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原（小鼠） Defensin Beta1(human 0.5mg Defensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人) Defensin Beta1 防御素β1抗原 0.5mg Defensin Beta1 防御素β1抗原 Defensin Beta1 防御素β1抗原 DDC (DOPA decarboxylase 0.5mg DDC (DOPA decarboxylase) 多巴胺脱羧酶（抗原） DDB2(DNA damage-binding protein 2 0.5mg 损伤DNA结合蛋白2抗原 DDB2(DNA damage-binding protein 2) 损伤DNA结合蛋白2抗原 DCX(Doublecortin 0.5mg 双皮质素抗原 DCX(Doublecortin) 双皮质素抗原 DCP peptide 异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原抗原 0.5mg DCP peptide 异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原抗原 DCP peptide 异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原抗原 DCC (Deleted in colorectal cancer gene 0.5mg 结直肠癌缺失基因抗原 DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 结直肠癌缺失基因抗原 DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase 0.5mg DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羟化酶（抗原） DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mg 凋亡相关蛋白激酶1抗原 DAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相关蛋白激酶1抗原 DAD1 (dopamine D1 receptor 1mg 多巴胺受体-D1抗原 DAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受体-D1抗原 Cytomegalovirus (CMV 0.5mg Cytomegalovirus (CMV)PP65 细胞巨化病毒(多肽) Cytochrome C 细胞色素 C（抗原 0.5mg Cytochrome C 细胞色素 C（抗原） Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61 0.5mg 富半胱氨酸肝素结合蛋白61抗原 Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61) 富半胱氨酸肝素结合蛋白61抗原 CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase 0.5mg CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 细胞色素P450单氧化酶(多肽抗原) CYP3A4(Cytochrome p450 3A4 0.5mg 细胞色素P450 3A4抗原 CYP3A4(Cytochrome p450 3A4) 细胞色素P450 3A4抗原 Cygb (cytoglobin 0.5mg 细胞球蛋 体复合物C5b-9抗体IgG Anti-CA125/FITC 荧光素标记卵巢癌抗原抗体IgG Anti-CA15-3/FITC 荧光素标记乳癌相关抗原抗体IgG Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Tyr245) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体IgG Anti-phospho-c Abl/v-abl(Tyr412) /FITC 荧光素标记兔抗人、大,小鼠磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体IgG Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Tyr204) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体IgG Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Thr735) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体IgG Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC 荧光素标记兔抗人、小鼠磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体IgG Anti-Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化组蛋白去乙酰化酶3抗体IgG Anti-CAD/CPAN/FITC 荧光素标记Caspase 激活的脱氧核糖核酸酶抗体IgG Anti-CA I/FITC 荧光素标记碳酸酐酶1抗体IgG Anti-CA II /FITC 荧光素标记碳酸酐酶2抗体IgG Anti-Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC 荧光素标记蛋白磷酸酯酶-2B催化亚单位抗体IgG Anti-caldesmon/smooth muscle /FITC 荧光素标记钙调结合蛋白/钙调素结合蛋白抗体IgG Anti-p-Caldesmon/FITC 荧光素标记磷酸化钙介质素抗体IgG Anti-Smoothened/SMOH /FITC 荧光素标记跨膜蛋白Smoothened抗体IgG Anti-Calpain 1/FITC 荧光素标记钙蛋白酶抗体IgG Anti-Calpain 2/FITC 荧光素标记钙蛋白酶2抗体IgG 小鼠杂交瘤细胞；3F16A4Anti-Calponin 1/FITC 荧光素标记钙调节蛋白-1抗体IgG Anti-Camk1g/FITC 荧光素标记钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗体 IgG Anti-CaMK2a/FITC 荧光素标记钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体IgG Anti-CaMK2b/FITC 荧光素标记 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
