细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；CHGF-001 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF CT-R (Calcitonin receptor) 降钙素受体（抗原） CTn1 (cardiac troponin 1 0.5mg 心肌肌钙蛋白 CTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌钙蛋白 CTLA-4/CD152 淋巴细胞相关抗原4/细胞毒性T细胞抗原-4 0.5mg CTLA-4/CD152 淋巴细胞相关抗原4/细胞毒性T细胞抗原-4 CTLA-4/CD152 淋巴细胞相关抗原4/细胞毒性T细胞抗原-4 CTGF (connective tissue growth factor 0.5mg CTGF (connective tissue growth factor) 结缔组织生长因子(多肽抗原) CTBP1(C-terminal binding protein 1 0.5mg C端结合蛋白1抗原 CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端结合蛋白1抗原 CT (Calcitonin 0.5mg CT (Calcitonin ) 降钙素（抗原） CSIG(cellular senescence inhibited gene 0.2ml 细胞衰老抑制基因抗原 CSIG(cellular senescence inhibited gene) 细胞衰老抑制基因抗原 CRP (C-reactive protin 0.5mg CRP (C-reactive protin) C-反应蛋白（抗原） CRMP2/Dpysl2(collapsin response mediator protein-2 0.5mg 二氢嘧啶酶样2CRMP2抗原 CRMP2/Dpysl2(collapsin response mediator protein-2) 二氢嘧啶酶样2CRMP2抗原 CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor 0.5mg 降钙素受体样蛋白抗原 CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor) 降钙素受体样蛋白抗原 Cripto-1(N-Terminus 0.5mg N端 Cripto-1(N-Terminus) 畸胎瘤衍化生长因子抗原(表皮生长因子相关肽)N端 Cripto-1(C-Terminus 0.5mg C端 Cripto-1(C-Terminus) 畸胎瘤衍化生长因子抗原(表皮生长因子相关肽)C端 CRF (Corticotropin-Releasing Factor 0.5mg 促肾上腺皮质激素释放因子 CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促肾上腺皮质激素释放因子 CRF (Corticotropin-Releasing Factor 0.5mg 促肾上腺皮质激素释放因子 CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促肾上腺皮质激素释放因子 CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mg CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 环腺苷酸应答元件结合蛋白（抗原） cRaf/Raf1(c-raf 1 0.5mg cRaf/Raf1抗原 cRaf/Raf1(c-raf 1) cRaf/Raf1抗原 CR (Calretinin 0.5mg CR (Calretinin) 钙结合蛋白（抗原） CPT1A peptide 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A多肽抗原 0.5mg CPT1A peptide 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A多肽抗原 CPT1A peptide 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A多肽抗原 c-phycocyanin(C-PC 0.5mg c-phycocyanin(C-PC) C-藻蓝素(藻蓝蛋白) C-Peptide( C-PEP 0.5mg C-Peptide( C-PEP ) C-肽（C肽） COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2 0.5mg COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2) 前列腺素氧化环化酶2(抗原) COX-1 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-1 0.5mg 前列腺素氧化环化酶1抗原 COX-1 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-1) 前列腺素氧化环化酶1抗原 Connexin-45(CX45 0.5mg 记半胱胺酸蛋白酶-10抗体IgG Anti-Caspase-12(hunman)/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体(人)IgG Anti-Caspase-12/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体IgG Anti-Caspase-13/FITC 荧光素标记半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗体IgG Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体IgG Anti- Alpha-Catenin/ Alpha-cats /FITC 荧光素标记α-连环蛋白抗体（α-α链接素）IgG Anti- Beta-catenin/ Beta-cats /FITC 荧光素标记 β-连环蛋白抗体IgG Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化β 连环素蛋白抗体IgG anti-p- Beta catenin/FITC 荧光素标记磷酸化β-连环蛋白抗体IgG Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser45)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化β 连环素蛋白抗体IgG Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化β 连环素蛋白抗体IgG Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser675) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化β 连环素蛋白抗体IgG Anti-Phospho- Beta-Catenin (Thr41/Ser45) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化β 连环素蛋白抗体IgG Anti- Gamma-Catenin/ Gamma-cats /FITC 荧光素标记γ-连环蛋白抗体（γ-γ链接素）IgG anti-cath-B/CB/FITC 荧光素标记组织蛋白酶B抗体IgG Anti-cath-D/CD /FITC 荧光素标记组织蛋白酶D抗体IgG Anti-cath-G/CG /FITC 荧光素标记组织蛋白酶G抗体IgG Anti-cath-H/CH /FITC 荧光素标记组织蛋白酶H抗体IgG 小鼠杂交瘤细胞；CHGF-001Anti-cath-K/CK /FITC 荧光素标记组织蛋白酶K抗体IgG anti-cath-L/CL /FITC 荧光素标记组织蛋白酶L抗体IgG Anti-Cathepsin B/FITC 荧光素标记兔抗组织蛋白酶B抗体IgG Anti-Cav-1/FITC 荧光素标 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
