细胞名称 杂交瘤细胞；14A3 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C3 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF in 1 0.5mg 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原 CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1) 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原 CK8(Cytokeratin 8 0.5mg CK8(Cytokeratin 8) 细胞角蛋白8（多肽） CK7(Cytokeratin 7 0.5mg human 细胞角蛋白7抗原 CK7(Cytokeratin 7)human 细胞角蛋白7抗原 CK7 细胞角蛋白7 0.5mg CK7 细胞角蛋白7 CK7 细胞角蛋白7 CK5(Cytokeratin 5 0.5mg 细胞角蛋白5抗原 CK5(Cytokeratin 5) 细胞角蛋白5抗原 CK2(casein kinase 2 0.5mg 细胞角蛋白2抗原 CK2(casein kinase 2) 细胞角蛋白2抗原 CK19 细胞角蛋白19抗原 0.5mg CK19 细胞角蛋白19抗原 CK19 细胞角蛋白19抗原 CK19 细胞角蛋白19多肽抗原 0.5mg CK19 细胞角蛋白19多肽抗原 CK19 细胞角蛋白19多肽抗原 CK18(Cytokeratin 18 0.5ml CK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18抗原（C端） CK18(Cytokeratin 18 0.5mg CK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18(多肽) CK18 peptide 细胞角蛋白18多肽抗原 0.5mg CK18 peptide 细胞角蛋白18多肽抗原 CK18 peptide 细胞角蛋白18多肽抗原 CK17(Cytokeratin 17 0.5mg 细胞角蛋白17抗原 CK17(Cytokeratin 17) 细胞角蛋白17抗原 CK16(Cytokeratin 16 0.5mg 细胞角蛋白16抗原 CK16(Cytokeratin 16) 细胞角蛋白16抗原 CK14/17/42/10 peptide 细胞角蛋白14抗原 0.5mg CK14/17/42/10 peptide 细胞角蛋白14抗原 CK14/17/42/10 peptide 细胞角蛋白14抗原 CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19 0.5mg peptide 细胞角蛋白1/8/19抗原 CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 细胞角蛋白1/8/19抗原 C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun：active protein 1 0.5mg C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun：active protein 1) 原癌基因蛋白（活化蛋白1）（抗原） CIDEB peptide CIDEB抗原 0.5mg CIDEB peptide CIDEB抗原 CIDEB peptide CIDEB抗原 CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7 0.5mg CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 烟碱型乙酰胆碱受体α7(多肽) ChRM3 peptide 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗原 0.5mg ChRM3 peptide 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗原 ChRM3 peptide 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗原 ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mg ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M2（抗原） ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mg ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈碱型乙酰胆碱受体（抗原） ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor 0.5mg 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗原 ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M1抗原 Cholesterol 胆固醇 100g Cholesterol 胆固醇 Cholesterol 胆固醇 chloramphenicol/OVA 氯霉素偶联鸡卵白蛋白蛋白 荧光素标记兔抗人、大、小鼠微管结合蛋白CYLD抗体IgG Anti-phospho-CYLD(Ser418) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化微管结合蛋白CYLD抗体IgG Anti-CCL15/MIP5/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白15IgG Anti-CCL16/HCC-4/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白16抗体IgG Anti-CCL17/TARC/FITC 荧光素标记胸腺活化调节趋化因子抗体IgG Anti-ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 荧光素标记抗嗜酸粒细胞趋化蛋白2抗体IgG Anti-CCL23/MPIF-1/FITC 荧光素标记骨髓抑制因子1抗体IgG Anti-CCL24/Eotaxin-2/FITC 荧光素标记嗜酸粒细胞趋化蛋白24抗体IgG Anti-CCL27/CTACK/FITC 荧光素标记皮肤T细胞虏获趋化因子抗体IgG Anti-CCL26/FITC 荧光素标记抗嗜酸粒细胞趋化蛋白3抗体IgG Anti-CCL28/FITC 荧光素标记粘膜相关上皮趋化因子MEC抗体IgG Anti-CCP/FITC 荧光素标记兔抗瓜氨酸环肽抗体IgG Anti-CCR-1/FITC 荧光素标记趋化因子受体1抗体IgG Anti-CCR-2/5/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体2/5抗体IgG Anti-CCR-2A/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体2A抗体IgG Anti-CCR-2B/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体2B抗体IgG Anti-CCR-3/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体3抗体IgG Anti-CCR-4/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体4抗体IgG Anti-CCR-5/FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体5抗体IgG 杂交瘤细胞；14A3Anti-CCR6/CD196/FITC 荧光素标记趋化因子受体6抗体IgG Anti-CCR-7/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体7抗体IgG Anti-CCR-8 /FITC 荧光素标记细胞表面趋化因子受体8抗体IgG Anti-CCR-9/FITC 荧光素标记细胞 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
