细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；3G4

形态特性 淋巴母细胞样

生长特性 半贴壁生长

特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

传代方法 1:3传代，3-4天传1次

传代情况 C5

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 阴性

STR

同工酶

染色体

产品图片：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用：  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用：  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用：  加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用：  可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用：  试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF

B Enrichment Broth EB增菌液 250

用于李氏菌的增菌培养（MERCK标准） Fraser Medium Fraser 培养基 250

添加到HB4193中，用于李氏菌的选择性增菌培养 Fraser Supplement Fraser 添加剂 5ml*2支

用于李氏菌的增菌培养（MERCK标准） UVM Medium UVM培养基 250

添加到HB4195中，用于李氏菌的选择性增菌培养 UVM Supplement1 UVM 添加剂1 1ml*10支

用于膜滤法单增李氏菌选择性分离（NEOGEN标准） LM-137 Agar LM-137琼脂 250

用于啤酒中厌氧菌检测 UBA　Medium UBA　培养基 250

用于啤酒中厌氧菌检测 NBB　Agar NBB　培养基 250

用于啤酒中乳酸菌检测和分离培养 Raka-Ray Medium Raka-Ray 培养基 250

用于化妆品样品制备，前增菌培养（GB标准） Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth SCDLP液体培养基  250

用于化妆品细菌总数测定（GB标准） Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 卵磷脂吐温80营养琼脂  250

用于绿脓杆菌的选择性分离培养（GB标准） Acetamide Agar 乙酰胺琼脂    250

用于绿脓杆菌的选择性分离培养（GB标准） Cetrimide Agar 十六烷*基溴化铵琼脂  250

生化试验培养基，用于细菌（如金黄色葡萄球菌）甘露醇发酵试验（GB标准） Mannitol Medium 甘露醇发酵培养基  250

生化试验培养基，用于细菌明胶液化试验（GB标准） Gelatin Medium Base 明胶培养基基础  250

用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验（GB标准） King Medium A 绿脓菌素测定培养基(PDP)    250

用于化妆品中粪大肠菌群的测定（GB标准） Lactose Bile Medium 乳糖胆盐培养基    250

用于化妆品中细菌总数测定（GB标准） TTC Lecithin Tween80 Nutrient Agar TTC卵磷脂-吐温80-营养琼脂    250

用于化妆品中霉菌总数测定(Acumedia 方法) HC Agar Base HC琼脂基础 250

用于化妆品中微生物检测(Acumedia 方法) LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 改良LETHEEN琼脂基础 250

用于化妆品和微生物检测(Acumedia方法) TAT Broth TAT肉汤 250

用于生物制品霉菌无菌试验（GB标准） Fungi Medium 真菌培养基 250

用于测定酵母菌总数（GB标准） Yeast Peptone Dextrose Agar YPD琼脂  250

用于链霉素，卡那霉素，庆大霉素，红霉素等效价测定 Antibiotic Agar 抗生素检定培养基1号（高PH）  250

用于磺苄青霉素效价测定 Antibiotic Agar 抗

计数 WL Nutrient Agar WL营养琼脂 250

用于真菌检测 Sabouraud’s Agar，Modified 改良沙氏琼脂培养基    250

用于真菌检测(Acumedia 方法) Sabouraud BHI Agar 沙氏BHI琼脂 250

用于四环素检定中蜡样芽孢杆菌的培养(SN标准) Strain Medium(for B.Cereus) 菌种培养基      250

用于四环素残留的微生物学检定(SN标准) Tetracyline Examination Agar 四环素检定琼脂    250

用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养(SN标准) Glucose Tryptone Agar 葡萄糖胰蛋白胨琼脂 250

用于弯曲杆菌分离(SN标准) Brucella Agar 布氏琼脂    250

用于弯曲杆菌增菌肉汤和布氏琼脂制备(SN标准) Brucella Broth 布氏肉汤    250

用于空肠弯曲菌的分离培养(SN 、GB标准) Skirrow Agar Base,Modified 改良Skirrow氏琼脂基础    250

用于弯曲杆菌选择性分离培养(GB标准) Camp-BAP Agar Base,Modified 改良Camp-BAP氏琼脂基础 250

用于弯曲杆菌的TTC试验（GB标准） TTC Agar Base TTC 琼脂基础          250

用于弯曲杆菌甘氨酸耐受性试验（GB标准） Glycine Medium 甘氨酸培养基        250

用于弯曲杆菌的硫化氢试验（GB标准） H2S Test Medium 快速硫化氢试验琼脂    250

用于弯曲杆菌的DNA酶水解试验（GB标准） Dnase Agar Base with Methyl Green DNA酶甲基绿琼脂基础    100

用于弯曲杆菌的马尿酸钠水解试验（GB标准） 马尿酸钠培养基 100

用于弯曲杆菌的硫化氢试验（GB标准） 快速硫化氢(H2S)试验琼脂 250

用于弯曲杆菌选择性增菌培养(Merck方法) Bolton Selective Enrichment broth 波尔顿选择性增菌肉汤 250

用于弯曲杆菌分离培养(WHO方法) CCDA Base CCDA基础 250

每支添加于200mlCCDA基础中 CCDA Supplement CCDA添加剂 2ml*10支

用于弯曲杆菌分离培养(FDA方法) Campy-Cefex Agar Base Campy-Cefex 琼脂基础 250

每支添加于200ml Campy-Cefex 琼脂基础中 Campy-Cefex Supplement Campy-Cefex 添加剂 2ml*10

用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数（GB.SN标准） Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 甘露小鼠杂交瘤细胞；3G4醇卵黄多粘菌素琼脂基础（MYP） 250

用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定 (SN标准) Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础  250

用于蜡样芽孢杆菌的V-P试验(SN标准)

操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。