细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;ZUE12 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 100克 HYLB Broth HYLB肉汤 BR 250克 NA 普通肉汤琼脂培养基 一般细菌培养 250克 NB 普通肉汤培养基 一般细菌培养 250克 Peptone Water Medium 胰蛋白胨水培养基 用于靛基质试验 250克 Alkaline Peptone Water 3%氯化钠碱性蛋白胨水 副溶血性弧菌的选择性增菌培养 250克 Strain Store Medium 菌种保存培养基 常用细菌斜面传代 250克 Blood Agar Base 血琼脂基础培养基 供分离营养要求较高的致病菌用 250克 L-G Medium Base,Modified 改良罗氏培养基基础 结核杆菌的培养,计数保存,照光试验,药物敏感性测定及菌型鉴定 250克 MiddleBrook 7H10 Agar MiddleBrook 7H10琼脂 分枝杆菌的分离培养 250克 MiddleBrook 7H11 Agar MiddleBrook 7H11琼脂 分枝杆菌的分离培养 250克 Aeromonas Differential Agar 气单胞菌鉴别琼脂/Aeromonas Differential Agar 分离培养和鉴别气单胞菌 250克 AFPA 曲霉菌鉴别琼脂基础 曲霉菌分离培养 250克 Blood Enrichment Medium 血液增菌培养基 用于血液中致病菌的增菌培养 250克 Bromcersol Purple Broth Base 糖发酵基础肉汤 微生物检验中各种糖发酵实验,无菌加入各种糖醇类物质 250克 Thioglycollate Medium 需气菌厌气菌培养基 用于培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌 250克 ASS Agar 抗菌素磺胺类敏感试验琼脂 用于磺胺类灵敏度试验(WHO方法) 250克 AC Broth 通用培养肉汤 用于常见微生物增菌培养和不含防腐剂样品的无菌试验 250克 Egg-Yolk Salt Agar Base 卵黄高盐琼脂基础 生物制品金黄色葡萄球菌选择性分离 250克 Peptone From Casein Agar 酪胨琼脂 生物制品无菌试验 250克 肠道致病菌的选择性分离、培养 250克 Alkaline Agar 碱性琼脂平板 用于分离霍乱弧菌 250克 Alealine Bile Salt Agar AB琼脂 分离霍乱弧菌 250克 Tryptose Broth Base 胰示肉汤基础 用于肺炎链球菌、布鲁氏菌细菌的培养 250克 Dextrose Peptone Medium 葡萄糖蛋白胨培 ective Supplement 气单胞菌培养基添加剂 10支 用于培养支原体的基础培养基 Mycoplasma Broth Base 支原体培养基基础 250 一种通用培养基,用于各种微生物的培养(AOAC EP IDF NMKL USDA USP) Tryptose Soya Agar 胰蛋白胨大豆琼脂 250 用于布氏菌的选择性分离培养 Brucella Selective Medium 布氏菌选择性培养基 250 Rv 改良rv培养基 250 用于脆弱拟杆菌群的分离培养 BBE Agar 类杆菌-胆汁-七叶甙(BBE)琼脂 250 用于军团菌的选择性分离培养(OXOID方法) BCYE Agar(Legionella Agar) BCYE 琼脂(Legionella 琼脂) 250 发酵蛋白胨 250 用于念球菌的分离培养和计数(OXOID方法) BIGGY Agar(Nickerson Medium) BIGGY 琼脂 250 用于尿液中微生物的选择性分离培养(OXOID方法) C.L.E.D Medium C.L.E.D 培养基 250 每支加入100ml C.L.E.D 培养基中 C.L.E.D Medium Supplement C.L.E.D 培养基添加剂 1ml*5支 用于淋球菌的分离培养(OXOID方法) GC Agar GC琼脂 250 用于双歧杆菌的分离培养 BLB Medium BLB培养基 250 用于从含革兰氏阴性菌的标本中分离培养革兰氏阳性菌 PEA Agar PEA 琼脂 250g 用于过程中无菌监测(Acumedia方法) Eugonic Agar 艾格琼脂 250 用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) NTM Medium NTM 培养基 250 用于淋球菌的分离培养(Quelab方法) Thayer Martin Agar TM培养基 250 小鼠杂交瘤细胞;ZUE12用于基因工程中酵母菌的发酵培养 YNB Medium YNB 培养基 100 培养基原材料,提供细菌生长氮源,含色氨酸 Tryptone 胰蛋白胨 250 干酪素胰酶水解而成,培养基原材料 Peptone from Casein 酪蛋白胨 250 培养基原材料,提供细菌生长所需的生长 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |