细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;RH1 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C7 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养 250克 CIN Agar 耶尔森氏菌选择性琼脂 分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 250克 Y Medium Modified 改良Y培养基 分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 250克 ITC Broth TTC肉汤 分离培养耶尔森氏菌 250克 Malt Extract Agar 麦芽汁培养基 用于啤酒酵母等真菌分离传代 250克 MM,RV Medium 氯化镁孔雀绿肉汤 沙门氏菌的选择性增菌培养 200克 Malt Extract Broth 麦芽浸膏汤 酸性罐头食品无菌试验 250克 Manganese(II) Nutrient Agar 锰营养琼脂培养基 用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验 250克 VRBDA 结晶紫中性红胆盐葡聚糖琼脂 肠道菌计数和肠杆菌科鉴别 250克 Enterobacteria Enrichment Broth 肠道菌增菌液 肠道菌的增菌培养 250克 Czapek Dox Agar 察氏培养基 用于酵母菌的培养 250克 Salt Czapek Dox Agar 高盐察氏培养基 用于霉菌和酵母菌的计数 250克 Czapek Dox Peptone Agar 察氏蛋白胨培养基 酵母菌的培养 250克 Bismuth Sulfite Agar BS琼脂 用于食品中沙门氏菌的检验 250克 Bile Esculin Azide Agar 胆盐七叶苷叠氮钠琼脂 用于肠球菌的快速选择性分离培养和计数 250克 M-Enerococcus Agar M-肠球菌琼脂 用于滤膜法或直接平板法,从自来水、食品或其他标本中分离肠球菌 250克 BPW 缓冲蛋白胨水增菌液 沙门氏菌前增菌培养和李氏菌前增菌培养 250克 TSYEB 胰酶大豆酵母浸膏肉汤 用于单核细胞和李斯特菌增菌培养 250克 TSYEA 胰酶大豆酵母浸膏琼脂 用于单核细胞和李斯特氏菌的分离培养 250克 Listeria Enrichment Broth Base 李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础 李氏菌二步增菌 250克 PALCAM Agar PALCAM琼脂 单增李氏菌的选择性分离 250克 Oxford Agar Base OXA基础 单增李氏菌的选择性分离 250克 LPM Agar 李氏LPM琼脂 单增李氏菌的选择性分离 250克 Half Fraser Medium Half Fraser培养基 李氏菌的增菌培养 250克 Motility Test Medium(Semisolid) 药物敏感性试验 250克 Antibiotic Agar 抗生素1号培养基(PH6.5-6.6) 磺卞青霉素等的效价测定 250克 Antibiotic Agar 抗生素1号培养基(PH7.8-8.0) 链霉素、卡那霉素、庆大霉素、克拉霉素、妥布霉素、阿米卡星红霉素、阿奇霉素等效价测定 250克 Antibiotic Agar NO.2 抗生素2号培养基(PH6.5-6.6) 四环素、土霉素等的效价测定 250克 Antibiotic Agar NO.2 抗生素2号培养基(PH7.8-8.0) 克林霉素、林可霉素等的效价测定 250克 Antibiotic Agar NO.3 抗生素3号培养基 藤黄八叠球菌悬液的制备 250克 Antibiotic Agar NO.4 抗生素4号培养基 两性霉素B等的效价测定 250克 Antibiotic Agar NO.5 抗生素5号培养基 抗生素微生物的效价测定 250克 Antibiotic Agar NO.6 抗生素6号培养基 黏菌素等的效价测定 250克 Antibiotic Agar NO.7 抗生素7号培养基 头孢噻圬钠等的效价测定 250克 Antibiotic Agar NO.8 抗生素8号培养基 去甲万古霉素的效价测定 250克 SPCA 标准平板计数琼脂培养基 用于细菌总数的计数 250克 PCA 平板计数琼脂 食品细菌总数测定和平板计数 250克 MIU Medium Base MIU培养基基础 细菌的复合生化试验 250克 Lead Acetate Medium 乙酸铅培养基 用于细菌的硫化氢试验 250克 EF-18 Agar EF-18琼脂 滤膜法检测食品中沙门氏菌 250克 LST Broth LST肉汤 各种食品中大肠菌群近似值(MPN)测定 250克 E.Coli Broth 大肠杆菌检验肉汤 粪大肠菌群、大肠杆菌的检验 250克 mE.Coli Broth mEC肉汤 用于大肠杆菌O157选择性增菌 小鼠杂交瘤细胞;RH1250克 Modified Tryptic Soy Broth 改良胰蛋白胨大豆肉汤 大肠杆菌O157选择性增菌 250克 Lactose Broth Medium 乳糖肉汤培养基 用于食品中沙门氏菌检验前增菌;大肠菌群的增菌培养 250克 BGLB Broth BGLB肉汤 用于水样中大肠菌的检测 250克 Trypticase-Soy-Poly 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |