细胞名称 杂交瘤细胞;SCRV-G-1B2 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 卵黄甘露醇高盐琼脂基础 金黄色葡萄球菌的分离培养 250克 Modified Giolitti-Cantobi Broth 改良Giolitti-Cantobi肉汤 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养 250克 Mannitol Salt Aga 甘露醇盐琼脂 金黄色葡萄球菌的选择性分离培养 250克 Egg-Yolk Salt Agar 卵黄氯化钠琼脂培养基 金黄色葡萄球菌的选择性分离 250克 Membrane Endo Agar LES LES ENDO琼脂 膜过滤水中大肠杆菌计数 250克 Endo Agar Endo培养基 大肠菌群的检测 250克 RVS Broth RVS肉汤 食品中沙门氏菌检验选择性增菌 250克 MKTTN Broth MKTTN肉汤 食品中沙门氏菌检验选择性增菌 250克 Lysine Iron Agar LIA琼脂 食品中沙门氏菌生化试验 250克 MIO Medium 动力吲哚鸟氨酸培养基 动力、吲哚和鸟氨酸试验 250克 E Neutralizing Broth D-E中和肉汤 经防腐剂或消毒剂处理的样品增菌培养 250克 E Neutralizing Agar D-E中性琼脂 卫生环境中微生物的分离培养, 消毒效果测定 250克 M-Broth M肉汤 牛奶和乳制品中乳酸菌检测和增菌培养 250克 BGS Agar BGS琼脂 沙门氏菌分离培养 100克 Xylose Lysine Desoxycholate Medium XLD琼脂培养基 分离志贺氏菌属和沙门氏菌 250克 Desoxycholate Citrate Agar 脱氧胆酸钠枸橼酸盐琼脂 细菌总数的测定和分离培养,沙门氏菌分离培养 250克 DCLS Agar DCLS琼脂 致病性肠杆菌的分离 250克 VJ Agar Vogel-Johnson琼脂 病源标本和其他标本中甘露醇阳性金黄色葡萄球菌的选择性分离 100克 NAC Agar Medium NAC琼脂培养基 假单胞菌属分离培养 250克 Potato Dextrose Agar PDA琼脂 霉菌分离培养和霉菌酵母菌计数 250克 Brilliant Green Agar 亮绿琼脂培养基 沙门氏菌分离培养 250克 Clostridium Enrichment Medium 梭菌培养基 用于梭菌增菌培养 250克 Columbia Agar Medium 哥伦比亚琼脂培养 胰蛋白示磷酸盐肉汤 250g/瓶 用于苛养菌的增菌和培养 小牛浸液肉汤 250g/瓶 用于苛养菌的培养 小牛浸液琼脂 250g/瓶 用于苛养菌的培养 明胶培养基 250g/瓶 用于细菌的明胶生化试验 甘露醇发酵培养基 250g/瓶 用于甘露醇发酵试验 甘露醇培养基 250g/瓶 用于甘露醇发酵试验 醋酸铅培养基 250g/瓶 用于细菌产硫化氢试验,每 100ml培养基中添加 1 支 20104 溴甲酚紫琼脂基础(糖发酵基础) 250g/瓶 选择性添加 0.5-1%碳源,用于细菌 的分离和鉴别 溴甲酚紫肉汤基础 250g/瓶 选择性添加 0.5-1%碳源,用于细菌 的分离和鉴别 糖发酵培养基 250g/瓶 溴麝香草酚蓝为指示剂,不含碳源, 用于糖发酵试验(GB、药典) 淀粉培养基 250g/瓶 用于细菌淀粉水解试验 葡萄糖半固体琼脂 250g/瓶 用于葡萄糖利用(产酸、产气)实 验 石蕊牛乳培养基 250g/瓶 用于测定细菌对牛乳的发酵 丙二酸钠培养基 250g/瓶 用于细菌生化鉴定 蛋白胨水培养基 250g/瓶 用于细菌靛基质试验 杂交瘤细胞;SCRV-G-1B2精氨酸双水解酶试验培养基 250g/瓶 用于细菌的精氨酸双水解酶试验 鸟氨酸脱羧酶试验培养基 250g/瓶 用于细菌的鸟氨酸脱羧酶试验 氨基酸脱羧酶试验对照培养基 250g/瓶 用于细菌的氨基酸试验对照 缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基 250g/瓶 用 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |