细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；IIID12-G7

形态特性 淋巴母细胞样

生长特性 半贴壁生长

特征特性 可产生单克隆抗体。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

传代方法 1:3传代,2-3天传一代

传代情况 C30

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 阴性

STR

同工酶

染色体

产品图片：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用：  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用：  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用：  加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用：  可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用：  试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF

NAC 琼脂培养基 250g/瓶 用于铜绿假单胞菌的分离培养

洋葱假单胞菌琼脂基础（PC） 250g/瓶 用于洋葱假单胞菌的分离，每升培 养基中添加过滤除菌的 羟基噻吩 青霉溶液素（100mg）和多粘菌素 B 溶液（300,000units）

含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤（TSB-YE） 250g/瓶 用于李斯特氏菌的培养

含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂（TSA-YE） 250g/瓶 用于李斯特氏菌纯化

李氏增菌肉汤（LB1，LB2）基础 250g/瓶 用于李斯特氏菌增菌，每 225ml 培养 基中添加 1 支 21401 和 1 支 21402 组成 LB1，每 200ml 培养基中添加 1 支 21416 和 1 支 21417 组成 LB2

PALCAM 琼脂基础 250g/瓶 用 于 李 斯 特 氏 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 1 支 21403

Fraser 肉汤增菌液基础 250g/瓶 用于李斯特氏菌增菌，每 225ml 培养基中添加 21407、21408、21418 各 1 支组成 Half-Fraser，每 100ml 添加 1 套支 21419、21420 组成 Fraser

牛津琼脂（OXA）基础 250g/瓶 用 于 李 斯 特 氏 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 1 支 21409

EB 肉汤增菌液基础 250g/瓶 用于李斯特氏菌的选择性增菌，每225ml 培养基中添加 1 支 21410

改良 UVM 增菌液基础 250g/瓶 用于李斯特氏菌的选择性增菌，每225ml  培养基中添加  21422、21413各 1 支

LPM 琼脂基础 250g/瓶 用 于 李 斯 特 氏 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 1 支 21414

LPM 琼脂基础（含七叶苷与柠檬酸铁铵） 250g/瓶 用 于 李 斯 特 氏 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 1 支 21414

缓冲李斯特氏菌增菌肉汤基础 250g/瓶 用于李斯特氏菌的选择性增菌，每225ml 培养基中添加 1 支 21415

改良 McBride 琼脂基础（MMA） 250g/瓶 用于李斯特氏菌的选择性分离，每升 培养基中需添加   2.5g  苯乙醇及 200mg 环乙酰亚胺或 30mg 复达欣

改良牛津培养基 10 支/盒 每支用于 100ml11417 中

7.5%氯化钠肉汤 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌的均质增菌

10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤 250g/瓶 用 于 金 黄 色 葡 萄 球 菌 的 增 菌 和MPN 试验

Baird-Parker 琼脂基础 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌的选择性分 离与计数，每 95ml 培养基中添加1 支 20801

肠毒素产毒培养基 250g/瓶 用于葡萄球菌产毒素检验

卵黄氯化钠琼脂培养基 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌选择性分离， 每 65ml 培养基中添加 2 支 20804

甘露醇氯化钠琼脂培养基 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌的选择性分 离和培养

甘露醇卵黄培养基 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌计数(日本)， 每 100ml 培养基中添加 2 支 21001

甲苯胺蓝-DNA 琼脂 50g/瓶 用于耐热核酸酶试验

蛋白胨氯化钠溶液 250g/瓶 用于葡萄球菌等微生物检验中样 品的制备

改良 GC 肉汤基础 250g/瓶 用于葡萄球菌 MPN 计数，每 9ml单料管中添加 0.1ml20805，每 10ml双料管中添加 0.2ml20805

Vogel-Johnson 琼脂基础 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌选择性分离， 每 100ml 培养基中添加 1 支 20805

兔血浆纤维蛋白原（RPF）琼脂培养基 250g/瓶 用于凝固酶阳性葡萄球菌检测，需添加  20805、20806、牛纤维蛋白 原、胰酶抑制剂

哥伦比亚 CNA 琼脂 1000ml/瓶 用于革兰氏阳性球菌的分离，也可 羊血制备哥伦比亚 CNA 血琼脂

DNA 酶琼脂 100g/瓶 用于核糖核酸酶检测

葡萄球菌增菌肉汤基础 250g/瓶 用于凝固酶阳性葡萄球菌选择性 增菌，每 100ml 中加入 1 支 20805

葡萄球菌培养基 250g/瓶 用于葡萄球菌的分离（明胶、甘露 醇发酵试验）

10%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌的增菌

Chapman 琼脂培养基 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌的分离培养

Chapman Stone 琼脂培养基 250g/瓶 用于金黄色葡萄球菌的分离培养

3%氯化钠碱性蛋白胨水 250g/瓶 用于副溶血性弧菌选择性增菌

TCBS 琼脂 250g/瓶 用于副溶血性弧菌选择性分离

3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 250g/瓶 用于副溶血性弧菌纯化

3%氯化钠三糖铁琼脂 250g/瓶 副溶血性弧菌生化试验

我妻氏血琼脂基础 250g/瓶 用于副溶血性弧菌神奈川试验，每100ml 培养基中需添加 5ml50701

四号琼脂基础 250g/瓶 用 于 霍 乱 弧 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 2 支 20518

庆大霉素琼脂基础 250g/瓶 用 于 霍 乱 弧 菌 选 择 性 分 离 ， 每100ml 培养基中添加 1 支 20543

嗜盐菌选择性琼脂 250g/瓶 含 4%NaCl，用于副溶血性弧菌的纯 化

氯化钠多粘菌素 B 肉汤（SPB）基础 250g/瓶 用于副溶血性弧菌选择性增菌，每100ml 培养基中添加 1 支 20519

O/F 试验用培养基 250g/瓶 用于弧菌葡萄糖利用试验（O/F 试 验）

碱性蛋白胨水（APW） 250g/瓶 用于弧菌选择性增菌

氯化钠营养琼脂 250g/瓶 用于副溶血性弧菌的纯化

氯化钠三糖铁琼脂 250g/瓶 含 1.5%NaCl，用于弧菌生化试验

42℃生长试验用培养基 250g/瓶 用于副溶血性弧菌 42℃生长试验

mCPC 琼脂基础（CC 琼脂基础） 250g/瓶 用于创伤弧菌的选择性分离 。每 90ml 培养基中添加 2 小鼠杂交瘤细胞；IIID12-G7支 20541、1支 20542 和 1 支 21201

碱性琼脂 250g/瓶 用于霍乱弧菌的选择性分离

碱性胆盐琼脂 250g/瓶 用于霍乱弧菌的选择性分离

氯化钠蔗糖琼脂培养基 250g/瓶 用于副溶血性弧菌的分离培养

操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。