细胞名称 抗人单抗杂交瘤细胞;ⅠE3-A10 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 可产生单克隆抗体,抗原为人ORMolu-like2。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C30 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF TMⅡ琼脂基础 用于制备 MTMⅡ琼脂 Mueller-Hinton 琼脂 250g/瓶 用于细菌药敏试验 MH 肉汤 250g/瓶 用于稀释法进行药敏试验 四环素族检定培养基 250g/瓶 用于四环素族抗生素残留检测 AK 琼脂 2 号 250g/瓶 用于检测牛奶和乳制品中抗生素残 留时孢子液制备 HTM 培养基 250g/瓶 用于副嗜血杆菌纸片扩散法药敏试 验,每升培养基中需添加 15mg 无 菌 NAD 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基 250g/瓶 用于鲜乳中抗生素残留检验 LB 琼脂LB 250g/瓶 含 0.5%NaCl,用于分子生物学中大 肠杆菌的培养 NZCYM 肉汤 250g/瓶 用于大肠杆菌菌株培养,配方被推 荐用于重组l噬菌体的复制 NZYM 肉汤 250g/瓶 不含酸水解酪蛋白,用于大肠杆菌 菌株培养,配方被推荐用于重组l 噬菌体的复制 Luria 肉汤基础 250g/瓶 含 0.05%NaCl,用于大肠杆菌的培 养和保存,视需要每 1L 培养基中无 菌添加 10ml20%葡萄糖溶液 Luria 琼脂基础 250g/瓶 含 0.05%NaCl,用于大肠杆菌的培 养和保存,视需要每 1L 培养基中无 菌添加 10ml20%葡萄糖溶液 2×YT 培养基 250g/瓶 用于重组大肠杆菌菌株的培养 M9 低盐培养基 250g/瓶 用于制备 M9 低盐培养基,培养重 组大肠杆菌菌株 麦康凯琼脂基础 250g/瓶 不含碳水化合物,用于大肠杆菌的 发酵研究 低限肉汤(不含葡萄糖) 250g/瓶 用于分离和表现营养突变型大肠杆 菌和枯草芽孢杆菌的特性 低限琼脂 250g/瓶 用于分离和表现营养突变型大肠杆 菌的特性 SOC 培养基 250g/瓶 用于基因工程大肠杆菌的培养 SOB 培养基 250g/瓶 用于大肠杆菌分子遗传学菌株的培 养 肉汤Terrific 250g/瓶 用于大肠杆菌培养 选择性 APS 肉汤基础 250g/瓶 非动物源配方,用于分子生物学试 验中大肠杆菌的保存和培养 选择性 APS 超级肉汤基础 250g/瓶 非动物源配方,用于培养重组大肠 杆菌菌株,提高质粒产量 YPD 琼脂 250g/瓶 用于分子生物学实验中酵母菌的培 养和保存 YPD 肉汤 250g/瓶 用于分子生物学实验中酵母菌的培 养和保存 K 氏培养基 250g/瓶 用于饮料中耐热耐酸菌的检测,需 使用苹果酸调节 pH 肝浸液培养基 250g/瓶 用于布鲁氏菌属分离 胰蛋白胨琼脂培养基 250g/瓶 用于布鲁氏菌属检验 阿须贝氏(Ashby)培养基 250g/瓶 用于固氮菌的培养 根瘤菌培养基 250g/瓶 用于根瘤菌的保藏和培养 硅酸盐细菌培养基 250g/瓶 用于硅酸盐细菌的培养 固氮(茎瘤)根瘤菌培养基 250g/瓶 用于(茎瘤)根瘤菌培养 联合固氮菌培养基 250g/瓶 用于固氮螺菌的培养 光合细菌培养基 250g/瓶 用于光合细菌的培养 胱氨酸乳糖无电解质培养基 250g/瓶 无抑制性,用于泌尿系统致病菌的分离和培养,也可做深部培养的贮 运 包姜氏琼脂培养基 250g/瓶 用于百日咳杆菌的分离,需添加 1%甘油和 15%脱纤维羊血 50701 纤维素分解菌培养基 250g/瓶 用于纤维素分解菌的分离和鉴别, 纤维素分解菌周围有红色分解圈 脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵琼脂基础 250g/瓶 用于脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵试验 幽门螺杆菌琼脂培养基 250g/瓶 用于幽门螺杆菌的分离培养,需添 加抗生素及马血 碎肉培养基 250g/瓶 用于痤疮丙酸杆菌的培养,不含维 生素 K,需添加 11002(庖肉牛肉 粒) 黄原胶液体发酵培养基 1 万 ml/包 以葡萄糖为碳源,用于黄原胶 Tinsdale 琼脂基础 250g/瓶 用 于 白 喉 杆 菌 的 分 离 培 养 , 每100ml 培养基中需添加 10ml 血清 以及 1 支 22501 Tinsdale 琼脂基础添加剂 5ml×10 支/盒 每支用于 100ml12501 中 亚碲酸钾血琼脂基础 250g/瓶 用于白喉杆菌的分离培养,需添加 亚碲酸钾及羊血 吡哆醇 Y 培养基 100g/瓶 用于吡哆醇测定 Korthof 培养基 250g/瓶 用于钩端螺旋体的增菌培养,每 100ml 培养基中需添加兔(羊、或 马)血清 8ml EMJH 培养基 250g/瓶 用于钩端螺旋体的增菌培养,每 90ml 培养基中添加 1 支 22601 抗人单抗杂交瘤细胞;ⅠE3-A10发根农杆菌培养基 250g/瓶 用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时,显兰色 用于快速、准确检测大肠菌群大肠菌群培养24小时,显兰色 用于快速、准确同时检测大肠杆菌和大肠菌群,培养24小时,大肠杆 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |