细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;c7b8c1 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 可产生单克隆抗体。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit 兔子脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit 兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glucose transporter 1,GLUT1 ELISA Kit 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glucose transporter 3,GLUT3 ELISA Kit 兔子B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒 人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human glucose-6-phosphate isomerase,GPI ELISA Kit 兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒 人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glutamate dehydrogenase;GDH/GLDH ELISA Kit 兔载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 人谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T human glutamic acid decarboxylase autoantibody,GAD-Ab ELISA Kit 兔载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit 兔载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒 人谷氨酸脱羧酶(GAD)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glutathione peroxidase,GSH-Px ELISA Kit 兔抗平滑肌抗体(ASMA) ELISA试剂盒 人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human glutathione S-transferases,GSTpi ELISA Kit 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒 人谷胱甘肽硫转移酶pi基因(GSTpi)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human glutathione S-transferases,GSTs ELISA Kit 兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒 人谷胱甘肽S转移酶(GSTs)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human glutathione,GSH ELISA Kit 兔抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒 人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glycated Albumin,GA ELISA Kit 兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒 人糖化白蛋白(GA)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 兔血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 人糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit 兔血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA Kit 兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit 兔胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit 兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒 小鼠杂交瘤细胞;c7b8c1人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Human glycophosphatidylinositol,GPI ELISA Kit 兔子促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒 人糖磷脂酰肌醇(GPI)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T human glycoprotein 49A,Gp49a ELISA Kit 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |