细胞名称 小鼠肺细胞；MML1 形态特性 成纤维细胞样 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞系来源于一小鼠的肺组织。1984年由中国科学院昆明细胞库建立。 培养条件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS 传代方法 1：1传代；3-4天一次 传代情况 P2 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 荧光法（-） STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF t 白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒 人S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Soluble protein-100B，S-100B ELISA Kit 鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 人S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human soluble P-selectin，sP-selectin ELISA Kit 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒 人可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit 人β-微管蛋白(TUBB)ELISA试剂盒 人可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human soluble transferrin receptor，sTfR ELISA Kit 人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒 人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,sTREM-1 ELISA Kit 人血红蛋白β亚基(HB-β)ELISA试剂盒 人可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA Kit 人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）ELISA试剂盒 人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor，sTNFαR ELISA Kit 人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒 人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒 人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Somatostatin，SS ELISA Kit 人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒 人生长抑素(SS)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit 人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒 人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Specifie Macrophage Arming Paetot,SMAF ELISA Kit 人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒 人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human sphingomyelin,SM ELISA Kit 人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒 人鞘磷脂(SM)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human spleen tyrosine kinase,Syk ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗体IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA试剂盒 人脾脏酪氨酸激酶(Syk)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Squamous Cell Carcinoma Antigen 2,SCCAg 2 ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA试剂盒 人鳞状上皮细胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human squamous cell carcinoma related antigen,SCCAg ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA试剂盒 人鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human sreum albumin，HSA ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗体IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA试剂盒 人血清白蛋白(HSA)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human SS-B/La Antibody,ELISA Kit 人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA试剂盒 人抗SS-B/La抗体ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Staphylococal protein A,SPA ELISA Kit 人β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒 人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human staphylococcus aureus enterotoxins,SE ELISA Kit 人β乳糖蛋白抗体IgG ELISA试剂盒 人金葡菌肠毒素(SE)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA Kit 人淀粉样前体蛋白(βAPP)ELISA试剂盒 人干细小鼠肺细胞；MML1胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Stem cell factor/mast cell growth factor，SCF/MGF ELISA Kit 人α突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒 人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human steroid producing cell autoantibody,SCA ELISA 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
