细胞名称 小鼠肺成纤维细胞；WML2 形态特性 成纤维细胞样 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞系来源于一雄性小鼠的肺组织。1985年中国科学院昆明细胞库建立。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS 传代方法 1：2传代；3-4天一次 传代情况 P6 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 荧光法（-） STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 人尿游离皮质醇(UFC)ELISA试剂盒 人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3，TIMP-3 ELISA Kit 人膀胱癌抗原(UBC)ELISA试剂盒 人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4，TIMP-4 ELISA Kit 人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA试剂盒 人基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Tissue Polypeptide Antigen，TPA ELISA Kit 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒 人组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse，t-PA ELISA Kit 人尿素酶相关蛋白C(UreC)ELISA试剂盒 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human T-lymphotropicvirusⅠ,HTLV-ⅠELISA Kit 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)ELISA试剂盒 人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA Kit 人高敏*状腺原氨酸(u-T3)ELISA试剂盒 人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human TNF α converting enzyme,TACE ELISA Kit 人高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒 人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T human toll-like receptor 2,TLR2 ELISA Kit 人高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒 人toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 人超敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)ELISA试剂盒 人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Total bile acide,TBA ELISA Kit 人超敏生长激素(U S-GH)ELISA试剂盒 人总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human total prostate s pecific antigen,tPSA ELISA Kit 人超敏游离雌三醇(uE3)ELISA试剂盒 人总前列腺特异抗原(tPSA)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Total protein S,TPS ELISA Kit 人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒 人总蛋白S(TPS)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human toxic shock syndrome toxin,TSST-1 ELISA Kit 人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒 人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit 人泛素蛋白D(UBD)ELISA试剂盒 人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T human tranGSlutaminase 2C polypeptide，TGM2 ELISA Kit 人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA试剂盒 人转谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Transfer factor，TF ELISA Kit 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA试剂盒 人转移因子(TF)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human transferrin receptor，TFR ELISA Kit 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒 人转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human transforming growth factor α，TGF-α ELISA Kit 人酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒 人转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human Transforming Growth factor β1，TGF-β1 ELISA Kit 人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒 人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human transforming growth factors β2，TGFβ2 ELISA Kit 人肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子 小鼠肺成纤维细胞；WML2(TWEAK)ELISA试剂盒 人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T human transfusion transmitted virus,TTV ELISA Kit 人肿瘤相关抗原(TAA)ELISA试剂盒 人输血传播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA试剂盒 规格： 96T/48T 规格： 96T/48T Human transporter associated with antigen processing, 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
