细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;IIF1D2C8F11 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 可产生单克隆抗体。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C34 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF t 人可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒 猴Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Monkey β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit 人可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒 猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA Kit 人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒 小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit 人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA试剂盒 小鼠16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit 人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒 小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit 人可溶性腺苷酸环化酶(sAC)ELISA试剂盒 小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 人蜗牛同源物2(SNAI2)ELISA试剂盒 小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA试剂盒 小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit 人小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA试剂盒 小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit 人横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒 小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISA试剂盒 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA A630077B13 基因 ELISA试剂盒 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 ELISA试剂盒 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA试剂盒 小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 ELISA试剂盒 小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 2610307008 基因 ELISA试剂盒 小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 人类似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA试剂盒 小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse acetylcholine,ACH ELISA Kit 人类似cDNA顺序BC027382 ELISA试剂盒 小鼠乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse activated protein C,APC ELISA Kit 人抗信号识别颗粒抗体(SRP)ELISA试剂盒 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse Activin A,ACV-A ELISA Kit 人唾液酸(SA)ELISA试剂盒 小鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T 小鼠杂交瘤细胞;IIF1D2C8F11Mouse Activin A,ACV-A ELISA Kit 人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒 小鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T Mouse adiponectin,ADP ELISA Kit 人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒 小鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T 规格: 96T/48T mouse adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |