细胞名称 病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞来源于一正常男性的外周血。2005年由中国科学院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS 传代方法 1:2传代；5-6天一次 传代情况 P7 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 荧光法（-） STR Amelogenin：XY；D8S1179：14,16；D21S11：30,33.2；D7S820：11,12；CSF1PO：10；D3S1358：17；TH01：7， 9；D13S317：8，12；D16S539： 11，12；D2S1338：,17,20；D19S433：13,14；vWA：19；THOX：8；D18S51：14,15；D5S818：10,11 ；FGA：24。 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 10g 可溶性淀粉 效价测定 140602-200313 200IU/支 玻璃酸酶 效价测定 140603-200609 1280IU/支 尿激酶（UK） 供尿激酶效价测定用试剂 140604-200623 190BP/支 凝血酶（牛血） 供尿激酶效价测定用 140605-200424 10U/支 纤维蛋白溶酶原（牛血） 供尿激酶效价测定用试剂 140606-201024 98.9mg/支 纤维蛋白原（牛血） 供尿激酶效价测定用 140607-200736 5g 牛血红蛋白 供尿激酶效价测定用试剂 140608-201014 100mg L-酪氨酸 效价测定 140609-200711 15mg 溶酶小球菌底物 效价测定 140610-200612 50mg 辅酶 Q10 含量测定 140611-200803 1.5g 牛胆盐 效价测定 140612-200506 41U/支 磷酸转乙酰化酶 供辅酶A效价测定用标准试剂 140613-200644 300mg 乙酰磷酸二锂盐 效价测定用标准底物 140614-200613 0.1g 胰蛋白酶 效价测定 140615-200206 约3mg 蛋白低分子量标准（SDS法） 分子量测定 140618-200302 13.7mg/200919 血清白蛋白（牛） 蛋白含量测定 140619-200919 64Iu/支 降纤酶 效价测定 140620-200301 46Iu/支 胰激肽原酶（猪胰激肽释放酶） 效价测定 140621-200906 0.2ml冻干粉 肠膜状明串珠菌 供右旋糖酐用 140622-200610 / 粪肠球菌 供乳酶生用 140623-200708 每支100mg 十八种氨基酸(套) 含量测定 140624-200805 560IU/支 凝血酶 效价测定 140625-201009 凝固物含量59% 纤维蛋白原（牛血） 供凝血酶测定用 140626-201009 约25mg/支 利巴韦林 含量测定 140629-200202 alanyl tRNA synthetase 2) 成骨特异性转录因子抗体 Anti-CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2) 程序性死亡配体1抗体 Anti-B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配体2抗体 Anti-B7-DC/PDL2/CD273(programmed death ligand 2) 刺激分子B7-1蛋白抗体 Anti-CD80/B7-1 促肾上腺皮质激素(1-39)抗体 Anti-ACTH (Adrenorticotrophin hormons 1-39) 促肾上腺皮质激素(18-39)抗体 Anti-ACTH (Adrenorticotrophin hormons 18-39) 促肾上腺皮质激素(7-23)抗体 Anti-ACTH (Adrenorticotrophin hormons 7-23) 胆囊收缩素抗体/缩胆囊素抗体(八肽) Anti-CCK8(Cholecystokinin-8) 胆汁酸盐输出泵蛋白抗体 Anti-BSEP(Bile salt export pump) 蛋白磷酸酯酶-2B催化亚单位抗体 Anti-Calcineurin α /PP-2B alpha 1 淀粉样肽前体蛋白抗体 Anti-APP695/770（Amyloid protein precursor 695/770 ） 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制剂抗体 Anti-AVEN(apoptosis, caspase activation inhibitor) 凋亡蛋白活性因子-1抗体（C端） Anti-Apaf-1（Apoptosis protease activating factor-1）(CT) 凋亡蛋白活性因子-1抗体（N端） Anti-Apaf-1（Apoptosis protease activating factor-1）(NT) 调节活化的正常T细胞表达和分泌的因子（趋化因子） Anti-CCL5/RANTES（regulated on activation normal T cell expressed and secreted） 调亡诱导因子抗体 Anti-AIF（Apoptosis-Inducing Factor） 丁酰胆碱脂酶抗体(C端) Anti-BCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰胆碱脂酶抗体(N端) Anti-BCHE(butyrylcholinesterase)NT 多配体蛋白聚糖1抗体 Anti-CD138/Syndecan-1 病毒转化的人B淋巴细胞；KM0501 反应性溶血膜抑制蛋白抗体 Anti-CD59/potectin 芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体 Anti-Aromatase (Cytochrome p450 19A1; Estrogen synthetase) 芳香化酶抗体 Anti-Aromatase (Cyt 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
