细胞名称 病毒转化的人B淋巴细胞；HYL 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞来源于一彝族女性的外周血。1994年由中国科学院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS 传代方法 1:2传代；5-6天一次 传代情况 P5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 荧光法（-） STR - 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 800ng/661IU/支 甲胎蛋白 免疫测定用 150542-0004 150ng/支 前列腺特异抗原 免疫测定用 150543-0004 0.5ml/支 游离前列腺特异抗原 免疫测定用 150544-200702 50ng/支 *腺原氨酸 免疫测定用 150550-0004 1000ng/支 甲状腺素 免疫测定用 150551-0004 23ng/支 反*腺原氨酸 免疫测定用 150552-0004 21ng/支 人胰岛素 C-肽 免疫测定用 150553-9911 19ng/支 胰高血糖素 免疫测定用 150554-9604 22.8IU/支 人绒毛膜促性腺激素 免疫测定用 150555-9003 4000IU/支 抗甲状腺球蛋白抗体 免疫测定用 150556-200601 430IU/支 抗甲状腺过氧化物酶抗体 免疫测定用 150557-200601 10000EU/支 细菌内毒素 检查 150600-200707 10支/盒 细菌内毒素（工作品） 检查 150601-201072 1mg/支 细菌内毒素（精品） 可用于建立动物发热模型 150602-200502 100mg ▲吗啡 含量测定 171201-200822 50mg ▲盐酸地芬诺酯 含量测定 171202-200604 50mg ▲磷酸可待因 含量测定 171203-200504 100mg ▲福尔可定 含量测定 171205-200504 20mg 06-单乙酰吗啡盐酸盐 20mg O3-单乙酰吗啡氨基磺酸盐 含量测定 171208-200609 20mg 乙酰可待因 含量测定 171209-200507 20mg ▲盐酸甲基安非它明 含量测定 171212-200603 100mg ▲蒂巴因 含量测定 171216-200403 100mg ▲硝西泮 含量测定 171217-200402 100mg ▲阿普唑仑 溶出度检查 171218-200603 100mg ▲艾司唑仑 含量测定 171219-200102 100mg ▲巴比妥 含量测定 171220-200602 100mg ▲异戊巴比妥 检查 rbonic anhydrase Ⅱ) 糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体 Anti-Amylin 天冬氨酸-胱氨酸特异性蛋白酶家族抗体 Anti-Caspase-1 (ICE/CASP-1/P45) 铜转运蛋白质α链抗体 Anti-ATP7A(ATPase Cu++ transporting alpha polypeptide; Copper pump 1) 铜转运蛋白质β链抗体 Anti-ATP7B 兔抗牛血清白蛋白抗体 Anti-BSA 晚期糖基化终末产物抗体 Anti-AGEs (advanced glycosylation end products) 晚期糖基化终末产物特异性受体抗体 Anti-AGER/RAGE（Advanced glycosylation end product-specific receptor） 吸引素抗体 Anti-ATRN(attractin) 细胞表面趋化因子受体10抗体 Anti-CCR-10(C-C chemokine receptor 10) 细胞表面趋化因子受体1抗体 Anti-CCR-1(CC chemokine receptor 1) 细胞表面趋化因子受体2/5抗体 Anti-CCR-2/5(CC chemokine receptor 2/5) 细胞表面趋化因子受体2A抗体 Anti-CCR-2A(C-C Chemokine receptor 2A) 细胞表面趋化因子受体2B抗体 Anti-CCR-2B(C-C Chemokine receptor 2B) 细胞表面趋化因子受体3抗体 Anti-CCR-3(CC chemokine receptor 3) 细胞表面趋化因子受体4抗体 Anti-CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 细胞表面趋化因子受体6抗体 Anti-CXC-R6(CXC-chemokine receptor 6) 细胞表面趋化因子受体7抗体 Anti-CCR-7(C-C chemokine receptor 7) 细胞表面趋化因子受体8抗体 Anti-CCR-8(C-C chemokine receptor 8) 细胞表面趋化因子受体9抗体 Anti-CCR-9(C-C chemokine receptor 9) 细胞凋亡关联酪氨酸激酶抗体 Anti-AATK(Apoptosis associated tyrosine kinase) 细胞凋亡敏感性基因 Anti-CAS （Cellular Apoptosis Susceptibility） 细胞凋亡抑制因子5抗体 Anti-BIRC5/Survivin variant 细胞毒性受体NK-p30抗体 Anti-CD337/NKp30/NCR3(Natural killer cell p30-related protein) 细胞毒性受体NK-p44抗体 Anti-CD336/NKp44/NCR2(Natural killer cell p44-related protein) 细胞毒性受体NK-p46抗体 Anti-CD335/NKp46/NCR1 细胞分裂周期蛋白6抗体 Anti-Cdc6（Cell Division Cycle protein 6） 细胞间粘附分子-1抗体 Anti-CD54/ICAM-1(Intercellular dhesion molecule 1) 细胞间粘附分子-2抗体 Anti-CD102/ICAM-2（intercellular adhesion molecules-2） 细胞间粘附分子-3抗体 Anti-CD50/ICAM-3（intercellular adhesion molecules-3） 细胞死亡调解子抗体 Anti-Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death) 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子抗体 Anti-CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) 细胞质膜微囊蛋白-1抗体 Anti-Cav-1(Caveolin-1) 细胞周期调控因子34 Anti-Cdc34（Cell Division Cycle protein 34） 细胞周期相关激酶抗体 Anti-CCRK(Cell cycle related kinase) 病毒转化的人B淋巴细胞；HYL 衔接蛋白α抗体 Anti-alpha Adaptin/AP1 衔接蛋白β抗体 Anti-beta Adaptin/AP2 衔接蛋白γ抗体 Anti-γ-Adaptin 衔接因子蛋白含pH域磷酸酪氨酸结合域和亮氨酸拉链基元1抗体 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
