细胞名称 病毒转化的人B淋巴细胞；KM932 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞系来自一成年女性的外周血，中国科学院昆明细胞库于1993年通过EB病毒转化的方法建立。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS 传代方法 1:2传代；5-6天一次 传代情况 P8 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 荧光法（-） STR - 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 对羟基苯甲酸乙酯 对照品 含量测定（内标） 100847-200501 100mg 雌酮 对照品 系统适用性（HPLC） 100849-200501 100mg
人参二醇 对照品 鉴别 110701-200412 20mg
人参三醇 对照品 鉴别 110702-200311 20mg
人参皂苷Rgl 对照品 含量测定 110703-200425 20mg
人参皂苷Rb1 对照品 含量测定 110704-200420 20mg
对照品 含量测定 110705-200306 20mg
对照品 含量测定 110706-200505 20mg
丹皮酚 对照品 含量测定 110708-200506 200mg
齐墩果酸 对照品 含量测定 110709-200505 50mg
桂皮醛 对照品 含量测定 110710-200513 0.5ml
粉防己碱 对照品 含量测定 110711- 20mg
盐酸水苏碱 对照品 含量测定 110712-200508 20mg
盐酸小檗碱 对照品 含量测定 110713-200208 30mg
黄芩苷 对照品 含量测定 110715-200514 40m 钙介质素抗体 Anti-caldesmon 钙离子ATP酶通道蛋白抗体 Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase(Calcium-transporting ATPase type 2C member 1) 干细胞生长因子受体/细胞表面分化抗原抗体 Anti-CD117/c-kit/SCFR 肝再生增强因子抗体 Anti-ALR(augmenter of liver regeneration) 骨保护蛋白/骨钙素抗体 Anti-BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein) 骨成型蛋白受体1A抗体 Anti-BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨形态发生蛋白-2抗体 Anti-BMP2 (bone morphogenetic protein 2) 骨形态发生蛋白4抗体 Anti-BMP4（bone morphogenetic protein 4） 骨形态发生蛋白-7抗体 Anti-BMP-7(bone morphogenetic protein-7) 瓜氨酸环肽抗体 Anti-CCP (cyclic citrullinated peptide) 过敏毒素C5a（补体C5a）抗体 Anti-C5a 黑色素瘤细胞粘附分子CD146抗体 Anti-CD146/MCAM 环化酶相关蛋白CAP-2抗体 Anti-CAP2（Adenylyl cyclase-associated protein 2） 缓激肽B2受体抗体 Anti-Bdkrb2/B2R(Bradykinin receptor beta 2) 活化白细胞粘附分子抗体 Anti-CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化蛋白C抗体 Anti-APC（Activated protein Colorectal） 活化复制因子1抗体 Anti-ATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化复制因子2抗体 Anti-ATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化转录因子3抗体 Anti-ATF3 (Activating Transcription Factor3) 活化转录因子4抗体 Anti-ATF4(activating transcription factor 4) 活化转录因子6抗体 Anti-ATF6(activating transcription factor 6) 活性依赖的神经保护肽抗体 Anti-ADNP/NAP （Activity-dependent Neuroprotective protein ） 肌动蛋白α抗体 Anti-Actin α /α-SMA （Actin alpha , smooth muscle aorta） 激活素受体2A/激活素受体相互作用蛋白2a抗体 Anti-ARIP2a（Activin receptor 2A） 激活素受体2B/激活素受体相互作用蛋白2b抗体 Anti-ARIP2B（Activin receptor 2B） 极光激酶B抗体 Anti-Aurora B 间变型淋巴瘤激酶抗体 Anti-ALK/CD246Ag （Anaplastic Lymphoma Kinase） 碱性成纤维细胞生长因子抗体 Anti-BFGF/FGF-2 拮抗凋亡转录因子抗体 Anti-AATF（Apoptosis-antagonizing transcription factor） 精氨酸加压素受体2抗体 Anti-AVPR2(arginine vasopressin receptor 2) 巨噬细胞来源的趋化因子抗体 Anti-CCL22/MDC(CC chemokine ABCD-1) 巨噬细胞炎性蛋白3α抗体 Anti-CCL20/MIP3αMacrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 聚集蛋白抗体 Anti-Agrin 抗ABC膜转运蛋白抗体 Anti-ABCG4(ATP binding cassette, subfamily G member 4) 抗B淋巴细胞粘附分子CD22抗体 Anti-CD22/fpc1/blcam(B lymphocyte cell adhesion molecule) 抗CD38抗体（小鼠、大鼠） Anti-CD38（mouse, rat） 抗Jagged1/CD339抗体 Anti-CD339/Jagged1 抗布鲁氏菌抗体 Anti-Brucella 抗丁酰胆碱脂酶单克隆抗体 Anti-BCHE(mouse Anti-butyrylcholinesterase Monoclonal) 抗碱性磷酸酶抗体 Anti-AP/ALP(Alkaline phosphatase) 抗利尿激素/血管升压素抗体 Anti-ADH/AVP(Antidiuretic Hormone;Arginine Vasopressin) 抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗体 Anti-phospho-Bcl-xL(pSer62) 抗磷酸化原癌基因c-kit抗体 Anti-phospho-c-kit/SCFR/CD117(pTyr936) 抗牛酪蛋白抗体 Anti-Casein(bovine) 克拉拉细胞蛋白(Clara细胞分泌蛋白)抗体 Anti-CC16(Clara cell protein 16) 淋巴细胞趋化因子CCL21抗体 Anti-CCL21/6Ckine（Chemokine (C-C motif) ligand 21） 磷酸化APP(Tyr757)淀粉样肽前体蛋白抗体 Anti-phospho-APP（pTyr757） 磷酸化β-连环蛋白抗体 anti-p-β catenin（p-beta Catenin(phosphor-Y142)） 磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体 Anti-phospho-CaMK2a(pThr286) 磷酸化活化复制因子2抗体 Anti-phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 磷酸化相关死亡促进因子抗体 Anti-phospho-BAD(pSer128) 磷酸化雄激素受体抗体 Anti-phospho-AR（pSer580)(androgen receptor phospho-Ser580) 卵巢癌抗原抗体 Anti-CA125 （Ovarian cancer antigen） 毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 Anti-ATM(ataxia telangiectasia mutated) 锚定蛋白G抗体 Anti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3 免疫球蛋白结合蛋白-1抗体 Anti-CD79A/IGBP-1(Immunoglobuin binding protein-1) 膜辅蛋白/内源性辅助因子活性蛋白抗体 Anti-CD46/MCP/membrane cofactor protein(to rat, mouse) 膜辅蛋白/内源性辅助因子活性蛋白抗体(人) Anti-CD46/MCP/membrane cofactor protein (to human) 膜粘连蛋白 Ⅱ抗体 Anti-Annexin Ⅱ 膜粘连蛋白 Ⅲ抗体 Anti-Annexin Ⅲ 膜粘连蛋白 Ⅳ抗体 Anti-Annexin Ⅳ 膜粘连蛋白 I抗体 Anti-Annexin I 膜粘连蛋白 VI抗体 Anti-Annexin VI 膜粘连蛋白 V抗体 Anti-Annexin V 膜粘连蛋白A1抗体 Anti-ANXA1/P35(Annexin A1) 内收蛋白抗体 Anti-Adducin protein 钠钾ATP酶通道蛋白抗体 Anti-ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) 脑钠素/利钠肽抗体 Anti-BNP （Brain Natriuretic Peptide ） 脑源神经营养因子/脑衍化神经营养因子 Anti-BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 凝聚素α/β抗体 Anti-Apo J/Clusterin-α/β/Apolipoprotein J 凝血调节蛋白抗体 Anti-CD141(Thrombomodulin) 凝血酶Ⅲ抗体 Anti-ATH Ⅲ(Antithrombin Ⅲ) 桥连整合因子蛋白抗体 Anti-BIN1(Bridging integrator protein-1) 禽脑脊髓炎病毒抗体 Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 氢钾ATP酶通道蛋白抗体 Anti-ATP4B/H+K+ ATPase(potassium-transporting ATPase subunit 神经细胞粘附分子配体1抗体 Anti-CD171/NCAM-L1（Neural cell adhesion molecule ligand 1） 神经元突触前膜蛋白抗体 Anti-Amph(Amphiphysin) 腺泡Acinus抗体 Anti-Acinus (Apoptotic chromatin condensation Inducer in the nucleus) 相关死亡促进因子Bad抗体 Anti-Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 小鼠抗3-磷酸甘油醛脱氢酶单克隆抗体(内参抗体) Anti-GAPDH(mouse Anti-GAPDH Monoclonal) 小鼠抗β淀粉样肽（1-28）抗体 Anti-β-Amyloid（1-28） 心肌肌钙蛋白抗体 Anti-CTn1(Cardiac troponin 1) 心钠肽（心钠素）抗体 Anti-ANP(atrial natriuretic peptide) 锌指蛋白231抗体 Anti-Bassoon/BSN(zinc finger protein 231) 新的抑癌基因Brg1抗体 Anti-Brg1（brahma-related gene 1） 雄激素结合蛋白抗体 Anti-ABP（Androgen Binding Protein） 雄激素受体抗体 Anti-AR（Androgen Receptor) 溴脱氧尿苷单克隆抗体 Anti-BrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脱氧尿苷抗体 Anti-BrdU (Bromodeoxyuridine) 血管紧张素1转换酶抑制剂抗体 Anti-ACEI （Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitor ） 血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体 Anti-AT1R（Angiotensin II Type 1 Receptor） 血管紧张素Ⅱ-2型受体抗体 Anti-AT2R（Angiotensin Ⅱ Type 2 Receptor） 血管紧张素II抗体 Anti-AT-Ⅱ (Angiotensin Ⅱ) 血管紧张素I抗体 Anti-Ang I/AT1（Angiotensin I） 血管紧张素原抗体 Anti-AT/AGT（Angiotenogen） 血管紧张素转换酶2抗体 Anti-ACE2(Angiotensin converting enzyme 2) 血管紧张素转换酶抗体 Anti-ACE1( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管生成素-1抗体 Anti-ANG-1/(Angiopoietin 1; angiopoietin-like 4) 血管生成素-2抗体 Anti-ANG-2 (Angiopoietin 2)hu, mo, rat, pig, dog, chi 血管位蛋白样2/血管生成素样蛋白-2抗体 Anti-ANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2) 血管位蛋白样4/血管生成素样蛋白-4抗体 Anti-ANGPTL4/ANG-4 (Angiopoietin-like Protein 4) 血管组织血管紧张素Ⅱ1型受体抗体 Anti-Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a) 血小板内皮细胞黏附分子-1抗体 Anti-CD31（PECAM-1） 氧化还原因子1抗体 Anti-APEX1/Ref-1(redoxfactor-1) 一种抑癌基因抗体 Anti-BECN1(Beclin 1) 阴离子交换蛋白3抗体 Anti-AE3/SLC4A3（anion exchanger protein 3） 载脂蛋白D抗体 Anti-APOD/Apolipoprotein D 载脂蛋白E抗体 Anti-Apo-E （Apolipoprotein E） 病毒转化的人B淋巴细胞；KM932Acc-3(涎腺腺样囊性癌细胞) // AGS(胃腺癌细胞) CRL-1739 Ana-1(巨噬细胞) // AsPC-1(转移胰腺腺癌细胞) CRL- 操作方法: 1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
