细胞名称 病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1036

形态特性 淋巴母细胞样

生长特性 悬浮生长

特征特性 该细胞系来源于一无精症男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

传代方法 1:2传代；5-6天一次

传代情况 P2

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 荧光法（-）

STR -

同工酶

染色体

产品图片：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用：  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用：  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用：  加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用：  可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用：  试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF

豆腐果新苷A Helicianeoide A "≥95% "

豆腐果新苷B Helicianeoide B "≥95% "

豆蔻明 Cardamonin ≥98%

"杜鹃素 " Farrerol "≥98% "

断血流皂苷A/醉鱼草皂苷 Ⅳb Clinodiside A 98%

对羟基苯甲酸乙酯 Ethyl p-hydroxybenzoate "≥98% "

对香豆酸 p-Coumaric acid "≥98% "

"对叶百部碱 " tuberostemonine ≥97%

多烯紫杉醇 Docetaxel "≥99% "

"莪二酮(莪术二酮/姜黄二酮)  " Curdione "≥98% "

莪术醇 Curcumol "≥98% "

二氢丹参酮 I Dihydrotanshinone I "≥98% "

"二氢辣椒素 " Dihydrocapsaicin "≥98% "

二氢麻醉椒苦素 Dihidromethysticin "≥98% "

二氢石蒜碱 Dihydrolycorine "≥98% "

二氢杨梅素 Dihydromyricetin "≥98% "

二氢醉椒素 Dihydrokavain "≥99% "

番茄红素 Lycopene "≥95% "

番泻苷A Sennoside A "≥98% "

番泻苷C Sennoside C "≥97% "

番泻苷D Sennoside D "≥97% "

蜂斗菜内酯 Bakkenolide ≥98%

佛手柑内酯 Bergapten "≥95% "

"甘氨酸 " Glycine "≥98% "

甘草查尔酮A Licochalcone A "≥98% "

甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷 Liguiritigenin-7-O-D-apiosyl-4

CHL/IU [ CHL-11 ](中国仓鼠肺细胞) CRL-1935

CHO(中国仓鼠卵巢细胞) CRL-2092

CHO/dhFr-(中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞) CRL-9096

CNE(鼻咽癌细胞) //

COLO 205(结肠癌细胞) CCL-222

COLO-320(结肠腺癌细胞) //

COS-1(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞 ) CRL-1650

COS-7(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞) CRL-1651

CRFK(猫肾细胞) CCL-94

CTLL-2(T细胞) TIB-214

CV-1(非洲绿猴肾细胞) CRL-10478

CW-2(结肠腺癌细胞) //

Dami(巨核细胞白血病细胞)

DT40(鸡淋巴瘤细胞) //

DU145(前列腺癌细胞) HTB-81

EBTr (NBL-4)(牛胚气管细胞) CCL-44

Eca-109(食管癌细胞) //

病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1036EL4(淋巴瘤细胞) TIB-39

EL4. IL-2(淋巴瘤细胞) TIB-181

ES-2(卵巢透明细胞癌细胞) CRL-1978

F81(猫肾细胞) //

操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。