细胞名称 转染耐绒癌细胞；JEG-3-VP16-TNFa

形态特性 上皮样；多角

生长特性 贴壁生长

特征特性 表达TNFα。

培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418

传代方法 1:3传代；3~4天1次。

传代情况 C5

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 培养法（-）

STR

同工酶

染色体

产品图片：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉汤基础 规格:  100g 作用：  用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格:  250g 作用：  用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格:  250g 作用：  用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格:  250g 作用：  加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格:  250g 作用：  可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格:  2x5支 作用：  试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF

五加甙E 39432-56-9

20mg/支 竹节香附素A Raddeanin A 银莲花素A 89412-79-3

20mg/支 刺五加叶中 Hederasaponin B 36284-77-2

20mg/支 柴胡皂苷A Saikosaponin A 20736-09-8

20mg/支 柴胡皂苷C Saikosaponin C 20736-08-7

20mg/支 柴胡皂苷D Saikosaponian D 20874-52-6

柴胡皂苷B1 Saikosaponin B1 58558-08-0

20mg/支 柴胡皂苷B2 Saikosaponin B2 58316-41-9

20mg/支 土贝母苷甲 Tubeimoside I 102040-03-9

20mg/支 牛蒡子苷 Arctiin 牛蒡苷 20362-31-6

20mg/支 靛蓝 Indigo 靛兰 482-89-3

20mg/支 黄柏酮 Obacunone 奥巴叩酮 751-03-1

20mg/支 吴茱萸碱 Evodiamine 518-17-2

20mg/支 吴茱萸次碱 Rutaecarpine 84-26-4

20mg/支 松脂醇二葡萄糖苷 Pinoresinol diglucoside 松酯醇二葡萄糖苷 63902-38-5

20mg/支 2,3,5,4-四羟基二苯乙烯葡萄糖苷 2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside 2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 82373-94-2

20mg/支 贝母素甲 Peimine 贝母甲素 23496-41-5

20mg/支 贝母素乙 Peiminine 贝母乙素 18059-10-4

20mg/支 连翘苷 Phillyrin 487-41-2; 96420-61-0

20mg/支 三七皂苷R1 Notoginsenoside R1 三七皂甙R1 80418-24-2

20mg/支 酸枣仁皂苷A Jujuboside A 酸枣仁皂甙A 55466-04-1

20mg/支 酸枣仁皂苷B Jujuboside B 酸枣仁皂甙B 55466-05-2

酸枣仁皂苷D Jujuboside D 酸枣仁皂甙D

20mg/支 白桦脂酸 Betulinic acid 白桦酯酸 472-15-1

20mg/支 升麻素苷 Prim-O-glucosylcimifugin 升麻苷 80681-45-4

20mg/支 升麻素 Cimifugin 37921-38-3

20mg/支 异类叶升麻苷 Isoacteoside

100片装载玻片存储盒

50毫升罗口尖底离心管　　　

  24*24

32片装塑料晾片板

7毫升离心管　　　　　　　　

滤芯吸嘴0.5-10ul袋装

  24*50

1片装纸质邮寄夹

96孔PCR板

0.6ml低吸附型离心管

2.0ml,方孔

吸嘴0.5-10ul盒装

玻璃试管12*100             

  24*40

玻璃染色缸10.50*9.50*9.50

光明ＰＥ手套（规格大．中．小）　　　　

滤芯吸嘴300ul盒装,无菌

吸嘴0.5-10ul低吸附型，盒装

吸嘴0.5-10ul袋装

转染耐绒癌细胞；JEG-3-VP16-TNFa滤芯吸嘴0.5-10ul盒装,无菌

 S－22一次性刀片

吸嘴00ul黄色带刻度,盒装

吸嘴200ul无色尖嘴，盒装,无菌

操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。