细胞名称 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1/IL15 形态特性 圆形;淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 IL-15稳定表达 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 维持细胞浓度在2~4×105~8×105/ml,勿超过1×106/ml;2~3天换液1次。 传代情况 冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR Amelogenin:X; CSF1PO:11,13; D12S391:19; D13S317:13; D16S539:11,12; D18S51:13,14; D19S433:12.2,13; D21S11:30,32.2; D2S1338:17,18; D3S1358:15,17; D5S818:11,12; D6S1043:14; D7S820:10; D8S1179:10,14; FGA:24,25; Penta E:11,15; TH01:8,9.3; TPOX:8,11; vWA:16; 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 10236-47-2 20mg/支 柚皮素 Naringenin 480-41-1 20mg/支 岩白菜素 Bergenin 477-90-7 盐酸青藤碱 20mg/支 小檗碱 Berberine 黄连素碱 2086-83-1 20mg/支 黄连碱 Coptisine 3486-66-6 20mg/支 盐酸黄连碱 Coptisine chloride 氯化黄连碱 6020-18-4 20mg/支 胡黄连苷I Picroside I 胡黄连苦苷I 27409-30-9 20mg/支 胡黄连苷II Picroside II 胡黄连苦苷II 39012-20-9 10mg/支 胡黄连苷III Picroside III 胡黄连苦苷III 64461-95-6 20mg/支 表没食子儿茶素没食子酸酯 (−)-Epigallocatechin gallate EGCG 989-51-5 20mg/支 表儿茶素没食子酸酯 (−)-Epicatechin gallate ECG 1257-08-5 20mg/支 表没食子儿茶素 (−)-Epigallocatechin EGC 970-74-1 20mg/支 没食子儿茶素没食子酸酯 (−)-Gallocatechin gallate GCG 4233-96-9 20mg/支 银杏内酯A Ginkgolide A 15291-75-5 20mg/支 银杏内酯B Ginkgolide B 15291-77-7 20mg/支 银杏内酯C Ginkgolide C 15291-76-6 20mg/支 白果内酯 (−)-Bilobalide 银杏内酯BB 33570-04-6 20mg/支 斑蝥素 Cantharidin 56-25-7 20mg/支 去甲斑蝥素 Norcantharidin 1294030 20mg/支 龙胆苦苷 Gentiopicroside 20831-76-9 20mg/支 胆酸 Cholic acid 81-25-4 20mg/支 芝麻素 Sesamin 607-80-7 20mg/支 芝麻林素 Sesamolin 526-07-8 20mg/支 紫杉醇 Paclitaxel 33069-62- 组织蛋白酶E抗体 anti-cath-E/CE(Cathepsin E) 组织蛋白酶G抗体 Anti-CTSG/CG(Cathepsin G) 组织蛋白酶H抗体 Anti-cath-H/CH(Cathepsin H) 组织蛋白酶K抗体 Anti-cath-K/CK(Cathepsin K) 组织蛋白酶L抗体 anti-cath-L/CL(Cathepsin L) 22RV1(前列腺癌细胞) CRL-2505 293 [HEK-293] (人胚肾细胞) CRL-1573 肾上腺皮质发育异常蛋白抗体 Anti-ACD/PTOP(Adrenocortical dysplasia protein) 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1/IL15 肾上腺素能受体β1抗体 Anti-ADRB1 (β1-adrenergic receptor) 肾上腺素能受体β2抗体 Anti-ADRB2 (β2-adrenergic receptor ) 肾上腺素能受体β3抗体 Anti-ADRB3/β3-AR (β3-adrenergic receptor) 肾上腺髓质素抗体 Anti-ADM/AM (Adrenomedull 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |