细胞名称 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2 形态特性 克隆样 生长特性 贴壁生长 特征特性 裸鼠移植实验证明可向三个胚层分化。 培养条件 KO-DMEM + 15% FBS + 103U/ml LIF + 2mM L-Glu + 1% NEAA + 0.1M β-Mer 传代方法 1:10传代;3~4天传代一次 传代情况 冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 100mg 110875-200205 瓜氨酸 对照品 鉴别 20mg 110876-200204 亮氨酸 对照品 鉴别 100mg 110877-200001 儿茶素 对照品 含量测定 20mg 110878-200102 表儿茶素 对照品 含量测定 20mg 110879-200202 腺苷 对照品 含量测定 20mg 110880-200502 土荆皮乙酸 对照品 含量测定 20mg 110881-2005 龙脑 对照品 含量测定 20mg 110882-200504 木兰脂素 对照品 含量测定 20mg 110883-200502 葫芦巴碱 对照品 鉴别 20mg 110884-200203 大叶茜草素 对照品 含量测定 20mg 110885-200102 咖啡酸 对照品 含量测定 20mg 110886-200001 腺嘌呤 对照品 含量测定 20mg 110887-200202 尿苷 对照品 鉴别 20mg 110888-200502 环维黄杨星D 对照品 uv含量测定 20mg 110889-200102 苏氨酸 对照品 鉴别 100mg 110890-200001 组氨酸 对照品 鉴别 100mg 110891-200001 黄山药皂苷提取物 对照品 鉴别 200mg 110892-200403 积雪草苷 对照品 鉴别 20mg 110893-200201 羟基积雪草苷 对照品 鉴别 20mg 110894-200503 甜菜碱 对照品 含量测定 50mg 110895-200404 雪上一枝蒿甲素 对照品 BL琼脂培养基 250 用于双歧杆菌分离培养(GB标准) TPY medium TPY琼脂培养基 250 用于双歧杆菌增菌培养,使用时需加入氯化血红素和维生素K1(GB标准) PYG Broth Base PYG 液体培养基基础 250 用于单增李氏菌增菌培养(SN、GB标准) Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE) 250 每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB标准) 萘啶酮酸 10mg/支*5 添加于225ml HB4160中制成LB1 4.5mg*5 添加于225ml HB4160中制成LB1 4.0mg*5 每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB标准) 吖啶黄素 3.75mg/支*5 添加于225ml HB4160中制成LB1 2.7mg*5 添加于200ml HB4160中制成LB2 5mg*5 用于单增李氏菌的分纯,培养,可用于做7%羊血琼脂(SN标准) Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE) 250 用于单增李氏菌选择性分离(SN标准) Modified Mcbride Agar Base 李氏菌选择性培养基基础(MMA) 250 每支添加于 100ml HB4155 复达欣 3mg/支*5 适用于微生物检验中各种糖发酵实验,无菌加入各种糖醇类物质(SN标准) Bromcresol Purple Broth Base 糖发酵基础肉汤 250 添加奈啶酮酸,吖啶黄素,即为LB1,LB2,用于李氏菌二步增菌(GB标准) Listeria Enrichment Broth Base 李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础 250 生化试验培养基,用于细菌七叶苷利用试验(SN标准) Esculin Medium 七叶苷培养基 10 用于动力观察,菌种保存,H抗原位相变异试验等(SN标准) Motility Test Medium(Semisolid) 半固体动力培养基 250 用于单增李氏菌的选择性分离 Oxford Agar Base 牛津琼脂(OXA)基础 250 添于100ml HB4171中 多粘菌素E 2mg/支*5 用于低酸性罐头食品商业无菌检验 Bromcresol Purple Dextrose Broth 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 250 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2用于酸性罐头食品商业无菌检验 Acid Borth 酸性肉汤 250 用于酸性罐头食品商业无菌检验 Malt Extract Broth 麦芽浸膏汤 200 用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验 Mn2+Nutrient Agar 锰盐营养琼脂 250 加入卵黄,用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养 E 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |