细胞名称 杂交瘤细胞;1D12-B5 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C2 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 111522-200406 升麻素苷 对照品 含量测定 20mg 111523-200405 5-O-甲基维斯阿米醇苷 对照品 含量测定 20mg 111524-200503 木香烃内酯 对照品 含量测定 20mg 111525-200404 去氢木香内酯 对照品 鉴别 20mg 111528-200504 蒙花苷 对照品 含量测定 20mg 111529-200302 五味子酯甲 对照品 鉴别 20mg 111530-200505 毛蕊花糖苷(麦角甾苷) 对照品 含量测定 20mg 111531-200001 毛两面针素 对照品 鉴别 20mg 111532-200202 岩白菜素 对照品 鉴别 50mg 111533-200403 高三尖杉酯碱 对照品 鉴别 20mg 111534-200202 紫杉醇 对照品 含量测定 20mg 111535-200502 白藜芦醇 对照品 含量测定 20mg 111536-200304 土贝母苷甲 对照品 鉴别 20mg 111537-200501 松脂醇二葡萄糖苷 对照品 含量测定 20mg 111538-200403 槲皮苷 对照品 含量测定 20mg 111539-200001 薯蓣皂苷元 对照品 含量测定 20mg 111541-200001 反丁烯二酸(富马酸) 对照品 鉴别 20mg 111542-200001 荆芥油 对照品 鉴别 0.2ml 111543-200002 生姜油 对照品 鉴别 0.2ml 111544-200202 莪术油 对照品 鉴别 0.2ml 111545-200202 八角茴香油 对照品 鉴别 0.2ml 111546-200301 鱼腥草油 对照品 鉴别 ide Agar 乙酰胺琼脂 250 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准) Cetrimide Agar 十六烷*基溴化铵琼脂 250 生化试验培养基,用于细菌(如金黄色葡萄球菌)甘露醇发酵试验(GB标准) Mannitol Medium 甘露醇发酵培养基 250 生化试验培养基,用于细菌明胶液化试验(GB标准) Gelatin Medium Base 明胶培养基基础 250 用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准) King Medium A 绿脓菌素测定培养基(PDP) 250 用于化妆品中粪大肠菌群的测定(GB标准) Lactose Bile Medium 乳糖胆盐培养基 250 用于化妆品中细菌总数测定(GB标准) TTC Lecithin Tween80 Nutrient Agar TTC卵磷脂-吐温80-营养琼脂 250 用于化妆品中霉菌总数测定(Acumedia 方法) HC Agar Base HC琼脂基础 250 用于化妆品中微生物检测(Acumedia 方法) LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 改良LETHEEN琼脂基础 250 用于化妆品和微生物检测(Acumedia方法) TAT Broth TAT肉汤 250 用于生物制品霉菌无菌试验(GB标准) Fungi Medium 真菌培养基 250 用于测定酵母菌总数(GB标准) Yeast Peptone Dextrose Agar YPD琼脂 250 用于链霉素,卡那霉素,庆大霉素,红霉素等效价测定 Antibiotic Agar 抗生素检定培养基1号(高PH) 250 用于磺苄青霉素效价测定 Antibiotic Agar 抗生素检定培养基1号(低PH) 250 用于林可霉素,克林霉素等效价测定 Antibiotic Agar No.2 抗生素检定培养基2号(高PH) 250 用于霉菌、酵母菌计数 Rose Bengal Medium 玫瑰红钠琼脂 250 细菌培养,滴眼剂金黄色葡萄球菌培养等 Broth Medium 5%葡萄糖肉汤培养基 250 卫生检验,细菌数测定,无菌试验 Broth Agar Medium 肉汤琼脂培养基 250 分离培养霍乱弧菌,麦迪霉素检定用 普通琼脂斜面培养基(PH8.0-8.2) 250 用于生物制品无菌试验 Peptone from Casein Agar 酪胨琼脂 250 杂交瘤细胞;1D12-B5用于生物制品无菌试验 Dextrose Peptone Medium 葡萄糖蛋白胨培养基 250 用于两性霉素B等的效价测定 Antibiotic Agar No.4 抗生素检定培养基4号 250 用于粘菌素等的效价测定 Antibiotic Agar No.6 抗生素检定培养基6号 250 用于头孢噻肟钠等的效价测定 Antibiotic Ag 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |