细胞名称 杂交瘤细胞;18A4 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 别 100mg 111578-200201 L-羟脯氨酸 对照品 含量测定 50mg 111579-200201 降香挥发油 对照品 鉴别 0.2ml 111580-200503 甲基橙皮苷 对照品 UV法含量测定 20mg 111581-200403 紫菀酮 对照品 含量测定 20mg 111582-200201 青阳参苷元 对照品 含量测定 20mg 111583-200301 二氢欧山芹醇当归酸酯 对照品 含量测定 20mg 111588-200501 西红花苷-I 对照品 20mg 111589- 西红花苷-II 对照品 20mg 111590-200402 重楼皂苷 I 对照品 含量测定 20mg 111591-200402 重楼皂苷Ⅱ 对照品 含量测定 20mg 111592-200402 重楼皂苷 Ⅵ 对照品 含量测定 20mg 111593-200402 重楼皂苷 Ⅶ 对照品 含量测定 20mg 111594-200501 总银杏酸 对照品 鉴别 30mg 111595-200402 黄芩素 对照品 含量测定用 20mg 111596-200402 胡黄连苷-Ⅱ 对照品 含量测定 20mg 111597-200503 雷公藤酯甲 对照品 TLC-UV法含量测定 20mg 111598-200502 脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯 对照品 含量测定 20mg 111605-200301 丹参酮ⅡA磺酸钠 对照品 鉴别 50mg 111607-200402 芒果苷 对照品 含量测定 20mg 111608-200301 金龙胆草提取物 对照品 鉴别 500mg 111610-200503 甘草苷 对照品 含量测定 20mg 111615-200301 苯丙氨酸 对照品 鉴别 20mg 111616-200301(暂行) 牛磺酸 对照品 含量测定 20mg 111617-200301 二甲基甲酰胺 对照品 内标物 0.5ml 111618-200301 胆固醇 对照品 鉴别 50m inton Agar MH 琼脂(MHA) 250 弱选择性培养基,用于肠道致病菌的选择性分离 China Blue Agar 中国蓝琼脂 250 用于细菌复合生化试验(葡萄糖,乳糖) Kligler Iron Agar 克氏双糖铁琼脂 250 供分离营养要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板 Blood Agar Base N0.2 血琼脂基础2号 250 供分离营养要求较高的致病菌用,后加血液制成血平板 Blood Agar Base 血液琼脂基础 250 用于从血液中分离病原菌 Blood Enrichment Medium 血液增菌培养基 250 用于分离真菌,酵母菌等 TTC-Sabourand’s Medium 氯化三苯四氮唑-沙保罗培养基 250 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) Maconkey Agar 麦康凯琼脂 250 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) Maconkey Agar(without salt) 麦康凯琼脂(不含盐) 250 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) Maconkey Agar No.2 麦康凯琼脂2号 250 用于肠道致病菌的选择性分离、培养(OXOID方法) Maconkey Agar No.3 麦康凯琼脂3号 250 用于分离霍乱弧菌 Alkaline Agar 碱性琼脂平板 250 用于分离霍乱弧菌 Alkaline Bile Salt Agar 碱性胆盐琼脂 250 用于肺炎链球菌、布鲁氏菌属细菌的培养 Tryptose Broth Base 胰膘肉汤基础 100 用于配制血琼脂、巧克力琼脂及亚碲酸盐琼脂 Blood Agar Base 豆粉琼脂(血琼脂基础) 250 用于L型细菌增菌培养 细菌L型增菌液 65 用于L型细菌分离培养 细菌L型分离琼脂 110 用于鼠疫杆菌培养 溶血琼脂基础 250 用于鼠疫杆菌的选择性培养 龙胆紫血液琼脂基础 250 杂交瘤细胞;18A4用于结核杆菌的培养、计数、保存、照光试验、药物敏感性测定及菌型鉴定等 L-G medium Base,modified 改良罗氏培养基基础 250 适用于碱性物质处理的结核杆菌标本 Acid L-G medium Base 酸性L-G培养基基础 250 适用于酸性物质处理的结核杆菌标本 Alkalin 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |