细胞名称 杂交瘤细胞;2F12 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C3 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 材 TLC法鉴别 3.0g 121231-200301 臭灵丹 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 121233-200301 波棱瓜子 中药对照药材 TLC法鉴别 0.5g 121234-200301 夜香牛 中药对照药材 TLC法鉴别 2.0g 121235-200301 山风 中药对照药材 TLC法鉴别 1.3g 121236-200401 船形乌头 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 121237-200502 柘木 中药对照药材 TLC法鉴别 25.0g 121238-200402 甜叶菊 中药对照药材 TLC法鉴别 2.0g 121239-200502 地稔 中药对照药材 TLC法鉴别 5.0g 121240-200402 檀香 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 121241-200401 毛大丁草 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 121242-200401 兔耳草 中药对照药材 TLC法鉴别 0.5g 121243-200301 祖师麻 中药对照药材 TLC法鉴别 3.0g 121244-0301 蜜环菌粉 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 121245-200301 红穿破石 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 121246-0301 海星 中药对照药材 TLC法鉴别 1.0g 121247-200502 山绿茶 中药对照药材 TLC法鉴别 5.0g 121248-200502 广金钱草 中药对照药材 TLC法鉴别 0.6g 121249-200402 大黄(掌叶大黄) 中药对照药材 TLC法鉴别 1.4g 121250-200503 没药(胶质没药) 中药对照药材 TLC法鉴别 0.5g 121251-0301 青风藤 中药对照药 50克 MYP agar base MYP琼脂基础 蜡样芽孢杆菌的固体平板计数 250克 SPS Agar SPS琼脂 产气荚膜梭菌的平板计数 250克 Chalmers Agar Modified 改良MC乳酸菌琼脂培养基 用于食品中乳酸菌总数的测定 250克 MRSA MRS琼脂 用于食品中乳酸菌的培养 250克 MRS Lactotacillus Agar Modified 改良MRS琼脂培养基 乳酸菌的测定,双歧杆菌和嗜酸乳酸菌的计数 250克 UBA Medium UBA培养基 啤酒中厌氧菌检测 250克 NBB Agar NBB琼脂 啤酒中厌氧菌检测 250克 Raka-Ray Medium 乳酸菌选择性培养基 啤酒中乳酸菌检测和分离培养 250克 LBS Agar 乳酸菌选择性琼脂 用于乳酸杆菌的检测 250克 APT Agar 多功能吐温琼脂 乳酸菌分离培养 250克 PYG Broth Base PYG液体培养基基础 双岐杆菌增菌培养 250克 Cooked Meat Medium Base 疱肉培养基基础 用于厌氧菌的分离培养 杂交瘤细胞;2F12250克 7.5% Sodium Chloride Broth 7.5%氯化钠肉汤 金黄色葡萄球菌选择性增菌 250克 Baird Parker Agar Base 贝尔德-帕克琼脂基础 用于金黄色葡萄球菌的分离培养 250克 Meat Infusion Broth 肉浸液肉汤 溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养 西蒙氏枸橼酸盐琼脂 用于肠道菌的柠檬盐利用试验 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |