细胞名称 杂交瘤细胞;S-171-9 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 10895-200303 0.1ml α-蒎烯 含量测定 常温,避光 110897-200001 10mg 二十八烷醇 含量测定 常温,避光 110899-200302 20mg 祖师麻甲素 含量测定 常温,避光 110900-200405 50mg 尿囊素 含量测定 常温,避光 111501-200202 30mg D-果糖 含量测定 常温,避光 111504-200001 30mg L(+)阿拉伯糖 鉴别 常温,避光 111506-200001 50mg 蔗糖 含量测定 常温,避光 111507-200001 50mg D-木糖 含量测定 常温,避光 111508-200404 20mg 三十烷醇 含量测定 常温,避光 111509-200302 20mg 异龙脑 含量测定 常温,避光 111512-200201 20mg 7-甲氧基香豆素 薄层鉴别 常温,避光 111513-200001 20mg 棉酚 鉴别 常温,避光 111517-200001 20mg 升麻苷 含量测定 常温,避光 111522-201008 20mg 毛两面针素 鉴别 常温,避光 111531-200902 20mg 富马酸 含量测定 常温,避光 111541-200001 0.2ml 荆芥油 鉴别 常温,避光 111542-200001 0.2ml 生姜油 鉴别 常温,避光 111543-200502 0.2ml 莪术油 鉴别 常温,避光 111544-200703 0.2ml 八角茴香油 鉴别 常温,避光 1115 250克 E Neutralizing Broth D-E中和肉汤 经防腐剂或消毒剂处理的样品增菌培养 250克 E Neutralizing Agar D-E中性琼脂 卫生环境中微生物的分离培养, 消毒效果测定 250克 M-Broth M肉汤 牛奶和乳制品中乳酸菌检测和增菌培养 250克 BGS Agar BGS琼脂 沙门氏菌分离培养 100克 Xylose Lysine Desoxycholate Medium XLD琼脂培养基 分离志贺氏菌属和沙门氏菌 250克 Desoxycholate Citrate Agar 脱氧胆酸钠枸橼酸盐琼脂 细菌总数的测定和分离培养,沙门氏菌分离培养 250克 DCLS Agar DCLS琼脂 致病性肠杆菌的分离 250克 VJ Agar Vogel-Johnson琼脂 病源标本和其他标本中甘露醇阳性金黄色葡萄球菌的选择性分离 100克 NAC Agar Medium NAC琼脂培养基 假单胞菌属分离培养 250克 Potato Dextrose Agar PDA琼脂 霉菌分离培养和霉菌酵母菌计数 250克 Brilliant Green Agar 亮绿琼脂培养基 沙门氏菌分离培养 250克 Clostridium Enrichment Medium 梭菌培养基 用于梭菌增菌培养 250克 Columbia Agar Medium 哥伦比亚琼脂培养基 营养要求较高的细菌的培养基及溶血试验,梭菌的检测 250克 Columbia-MUG Medium 哥伦比亚4-甲基伞形酮葡糖苷酸培养基 大肠杆菌的荧光检测 250克 Andrade,s Carbohydrate Broth 安德雷德氏糖类肉汤 细菌的糖发酵试验 250克 HLGB OF培养基 细菌的氧化发酵试验 杂交瘤细胞;S-171-9250克 Egg Yolk Agar Medium Base EYA培养基基础 肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养 250克 蜡样芽孢杆菌动力试验 250克 DRCA 强化梭菌鉴别琼脂 食品和其他物质中梭菌的计数和培养 250克 RCM 强化梭菌培养基 梭菌的增菌培养和计数 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |