细胞名称 杂交瘤细胞;3G12 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-Angiotensin II type 1A receptor 血管紧张素Ⅱ1A型受体抗体 生化培养基,用于细菌靛基质试验,亦称色氨酸肉汤(SN标准) Indole Medium 吲哚培养基 10 Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烃受体抗体 吲哚(靛基质)试验配套试剂 Kovacs氏靛基质试剂盒 10ml*1 Anti-AIF 调亡诱导因子抗体 生化培养基,用于细菌丙二酸盐利用试验(GB、SN标准) Malonate Broth 丙二酸钠培养基 10 Anti-AIF 调亡诱导因子抗体 生化培养基,用于细菌卫予醇发酵试验(SN标准) Dulcitol Semisolid Agar 卫矛醇半固体琼脂 10 Anti-AIMP2 AIMP2抗体 主要用于志贺氏菌的增菌培养,亦可用于沙门氏菌增菌培养(GB标准) Gram Negative Enrichment Broth GN 增菌液 250 Anti-Adenylate Kinase 1/ AK1 腺苷酸激酶-1抗体 选择性培养基,主要用于分离志贺氏菌属,亦可用于分离沙门氏菌(FDA标准) Xylose Lysine Desoxycholate Medium XLD 培养基 250 Anti-Aldolase A 醛缩酶A抗体 用于沙门氏菌的选择性分离(GB标准) WS Salmonella Agar WS 琼脂 250 Anti-ALK/CD246 间变型淋巴瘤激酶抗体 用于志贺氏菌的葡萄糖铵试验(GB标准) Ammonium Dextrose Medium 葡萄糖铵培养基 250 Anti-phospho-ALK/CD246 (Tyr1604) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体 用于志贺氏菌的复合生化试验(GB标准) Dextrose Semisolid Medium 葡萄糖半固体培养基 250 Anti-phospho-ALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体 用于细菌的复合生化试验 Motility Indol Urea Medium Base 动力-吲哚-尿素培养基基础(MIU) 250 Anti-phospho-ALK/CD246(Tyr1586) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体 用于硫化氢试验 Lead Acetate Medium 醋酸铅培养基 250 Anti-ALR 肝再生增强因子抗体 用于硫化氢、动力、吲哚试验 Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium SIM培养基 250 Anti-Alkaline phosphatase/PLAP 碱性磷酸酶抗体 用于食品中沙门氏菌检验前增菌 Lactose Broth 乳糖肉汤 250 Anti-APS APS抗体 用于滤膜法检测食品中沙门氏菌(SN/T1059.1) EF-18 Agar EF-18 琼脂 250 Anti-phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗体 使用前,每支加入100mlHB4153中 Novobiocin Sodium Salt 新生霉素 1.5mg/支*5 Anti-AP2 alpha 转录激活蛋白2α 用于食品中沙门氏菌检验选择性增菌(ISO标准) RVS Broth RVS 肉汤 250 Anti-ALT1 谷丙氨酸氨基转移酶1抗体 用于食品中沙门氏菌检验选择性增菌(ISO标准) MKTTn Broth MKTTn 肉汤 250 Anti-AMACR α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体 用于食品中沙门氏菌生化试验(FDA标准) Lysine Iron Agar 赖氨酸铁琼脂(LIA) 250 Anti-Amphiphysin 神经元突触前膜蛋白抗体 用于沙门氏的分离培养(MERCK方法) MSRV Medium,Modified 改良MSRV培养基 250 Anti-AMPK alpha 1 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 滤膜法食品中沙门氏菌前增菌(SN/T1059.1) SCCRAM Broth SCCRAM肉汤 250 Anti-phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 用于食品中沙门氏菌选择性分离培养(Merck方法) BPL Agar BPL琼脂 250 Anti-AMPK alpha 2 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 用于各种标本中沙门氏菌选择性分离培养(Merck方法) BPLS Agar BPLS琼脂 250 开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷 Secoisolariciresinol diglucoside ≥98% 柯里拉京 Corilagin 98% 柯诺辛 Corynoxine ≥94% 苦参碱 Matrine ≥98% 苦蒿素 Blinin (新增金龙胆草标准品) ≥95% 苦杏仁苷 Amygdalin ≥98% 奎宁 Quinine ≥95% 辣椒碱 Capsaicin ≥98% 老鹳草素 Geraniin 97% 雷公藤次碱 wilforine ≥98% 雷公藤定碱 wilfordine ≥97% 雷公藤红素,南蛇藤素 Celastrol (Tripterin, Tripterine) ≥98% 雷公藤吉碱 wilforgine ≥97% 雷公藤甲素(雷公藤内酯醇) Triptolide ≥98% 雷公藤内酯甲 wilforlide A 98% 雷公藤内酯酮 Triptonide 97% 利血平 Reserpine ≥98% 栎樱酸 Roburic acid ≥98% 连翘苷 Forsythin ≥98% 连翘脂苷 A Forsythiaside A ≥95% 连翘脂苷B Forsythoside B ≥98% 莲心碱高氯酸盐 Liensinine perchlorate ≥98% 灵芝酸A GANODERIC ACID A ≥94% 灵芝酸B GANODERIC ACID B ≥94% 龙胆苦苷 Gentiopicroside ≥98% 龙血素A Loureirin A 95% 杂交瘤细胞;3G12龙血素B Loureirin B ≥98.0% 芦丁 Rutin ≥95% 芦荟大黄素 Aloe-emodin ≥95% 芦荟苷A Barbaloin A ≥98% 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |