细胞名称 杂交瘤细胞;15B8 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) 磷酸化A-Raf抗体 细菌培养,滴眼剂金黄色葡萄球菌培养等 Broth Medium 5%葡萄糖肉汤培养基 250 Anti-B-Raf B Raf抗体 卫生检验,细菌数测定,无菌试验 Broth Agar Medium 肉汤琼脂培养基 250 Anti-c-Raf/Raf1 c Raf/Raf1抗体 分离培养霍乱弧菌,麦迪霉素检定用 普通琼脂斜面培养基(PH8.0-8.2) 250 Anti-phospho-B-Raf (Ser365) 磷酸化B-Raf抗体 用于生物制品无菌试验 Peptone from Casein Agar 酪胨琼脂 250 Anti-phospho-B-Raf (Ser445) 磷酸化B-Raf抗体 用于生物制品无菌试验 Dextrose Peptone Medium 葡萄糖蛋白胨培养基 250 Anti-phospho-B-Raf (Ser601) 磷酸化B-Raf抗体 用于两性霉素B等的效价测定 Antibiotic Agar No.4 抗生素检定培养基4号 250 Anti-BRCA1/BAP1 乳癌易感基因1抗体(人) 用于粘菌素等的效价测定 Antibiotic Agar No.6 抗生素检定培养基6号 250 Anti-Phospho-BAP1 (Ser592) 磷酸化乳癌易感基因1抗体(人) 用于头孢噻肟钠等的效价测定 Antibiotic Agar No.7 抗生素检定培养基7号 250 Anti-Phospho-BRCA1 (Ser1524) 磷酸化乳癌易感基因1抗体 用于去甲万古霉素等的效价测定 Antibiotic Agar No.8 抗生素检定培养基8号 250 Anti-BRCA1/BAP1 乳癌易感基因1抗体 用于生物制品金黄色葡萄球菌选择性分离 Egg-Yolk Salt Agar Base 卵黄高盐琼脂基础 250 Anti-BRCA2 乳癌易感基因2抗体 用于两性霉素B检定菌种培养 Antibiotic No.5 抗生素5号 250 Anti-BrdU 溴脱氧尿苷抗体 用于大肠杆菌测定 MUG Medium MUG培养基 100 Anti-BrdU 溴脱氧尿苷单克隆抗体 用于无菌生长试验 Fungi Agar Medium 真菌琼脂培养基 250 Anti-BrdU 溴脱氧尿苷抗体 用于甲基红试验 Phosphate Glucose Peptone Water Medium 磷酸盐葡萄糖胨水培养基 250 Anti-BRN3A 转录因子Brn3蛋白抗体 用于甲基红试验配套试剂 甲基红指示剂盒 10ml*1 Anti-Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受体3抗体 用于靛基质试验 Peptone Water Medium 胰蛋白胨水培养基 250 Anti-SMARCA4/SNF2 beta 抑癌基因SNF2β抗体 用于吲哚(靛基质)试验配套试剂 Kovacs氏靛基质试剂盒 10ml*2 Anti-Brucella 布鲁氏菌抗体 用于磺胺类灵敏度试验(WHO方法) Antibiotic sulfonamide sensitivity-test agar ASS 琼脂 250 Anti-BRMS-1 乳癌转移抑制基因1抗体 用于常见微生物增菌培养和不含防腐剂样品的无菌试验(Alpha Biosciences方法) AC Broth AC肉汤 250 Anti-Brucella 布氏杆菌菌体蛋白抗体 用于菌苗及生物制品霉菌无菌检验 Martin Broth ,Modified 改良马丁液体培养基 250 Anti-BSA 牛血清白蛋白抗体 用于生物制品霉菌无菌检验 Martin Agar Medium ,Modified 改良马丁琼脂培养基 250 0.5g 鹿衔草 TLC法鉴别 121211- 0.5g 番石榴叶 TLC法鉴别 121212-0101 1.0g 矮地茶 TLC法鉴别 121213-0101 0.5g 槐角 TLC法鉴别 121214-0101 0.1g 藤黄 TLC法鉴别 121215-200602 2.0g 八角麻 TLC法鉴别 121216-0101 1g 牛白藤 TLC法鉴别 121217-200502 8g 布渣叶 TLC法鉴别 121218-200503 2g 松塔 TLC法鉴别 121219-200502 2.0g 葶苈子(播娘蒿) TLC法鉴别 121220-0101 2.0g 百部(对叶百部) TLC法鉴别 121221-200402 1.0g 沉香 TLC法鉴别 121222- 1.0g 岗松 TLC法鉴别 121223-200301 1.0g 野木瓜 TLC法鉴别 121224-200602 2.0g 蒲黄 TLC法鉴别 121225-200502 1.0g 黑蚂蚁 TLC法鉴别 121226-200301 4.0g 路边青 TLC法鉴别 121227-200503 1.0g 槲叶 TLC法鉴别 121228-0301 0.4g 山橿根 TLC法鉴别 121229-0301 杂交瘤细胞;15B83.0g 山香圆叶 TLC法鉴别 121230-0301 1.0g 臭灵丹 TLC法鉴别 121231-200301 0.5g 波棱瓜子 TLC法鉴别 121233-200301 2.0g 夜香牛 TLC法鉴别 121234-200301 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |