细胞名称 杂交瘤细胞;TBCD6 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-CD27/TNFRSF7 CD27抗体 25克 Bile salt from sheep 羊胆盐 BR Anti-CD28 CD28抗体 25克 Bile salt from ox 牛胆盐 BR,60% Anti-CD144/VECD 上皮型钙粘附分子抗体 1公斤 Anti-CD147/TCSF 细胞外基质金属蛋白酶诱导因子抗体 25克 Bile salt from pig 猪胆盐 BR,65% Anti-CD160/By55 NK细胞受体BY55抗体 1公斤 Anti-CD161/NK1.1 CD161抗体 25克 Bile salt from poultry 禽胆盐 BR Anti-CD163/M130 CD163抗体 250克 Casein acid hydrolysate 酸水解酪蛋白 BR Anti-CD166/ALCAM/MEMD 活化白细胞粘附分子抗体 1公斤 Anti-CD158a/KIR2DL1 NK细胞抑制性受体2DL1抗体 100克 Casamino acid 酪蛋白水解物 BR Anti-CD158e NK细胞抑制性受体3DL1抗体 500克 Anti-CD158b2 NK细胞抑制性受体2DL3抗体 250克 Casein Hydrolysate 酶水解酪蛋白 BR Anti-CD158 NK细胞抑制性受体2DL4抗体 1公斤 Anti-CD158i NK细胞抑制性受体2DS4抗体 250克 Soy protein isolate 豆蛋白质 BR,90% Anti-CD158e NK细胞抑制性受体3DL1抗体 250克 Lactalbumin hydrolysate 水解乳蛋白 BR Anti-CD167a/DDR1 CD167a抗体 1公斤 Anti-CD169/sialoadhesin 唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素1抗体 200毫升 Calf serum 小牛血清 诊断试剂用 Anti-CD170/Siglec-5 唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素5抗体 200毫升 Fetal bovine serum(Characterized FBS) 标准胎牛血清 BR Anti-CD177/NB1 嗜中性粒细胞抗原CD177抗体 100毫升 Fetal bovine serum(Characterized FBS) 优级胎牛血清 BR Anti-CD17 CD17抗体 500毫升 Anti-CD226/DNAM-1 CD226抗体 100毫升 Fetal bovine serum(Defined FBS) 特级胎牛血清 BR 501 0.5g 牛至 TLC法鉴别 121435-200401 1.0g 小蓟 TLC法鉴别 121436-200501 500mg 肉桂叶 TLC法鉴别 121437- 2.0g 黑老虎根 TLC法鉴别 121438-200401 1.0g 土茯苓 TLC法鉴别 121439-200401 0.5g 胡椒(黑胡椒) TLC法鉴别 121440-200401 0.5g 胡椒(白胡椒) TLC法鉴别 121441-200401 2.0g 白前(柳叶白前) TLC法鉴别 121442-200501 3.0g 甘木通 TLC法鉴别 121443-200501 3.0g 野马追 TLC法鉴别 121444-200401 3.0g 大叶骨碎朴 TLC法鉴别 121445-200501 3.0g 盾叶薯蓣 TLC法鉴别 121446-200401 2.0水杨梅根 TLC法鉴别 121447-200601 90g 土荆芥 TLC法鉴别 121448-200702 2.0g 款冬花 TLC法鉴别 121449-200401 0.1g 绵大戟 TLC法鉴别 121450-200401 3g 金牛草 TLC法鉴别 121452- 1g 橙皮 TLC法鉴别 121453- 3g 制何首乌 TLC法鉴别 121454-200703 3.0g 香薷 TLC法鉴别 121456-200401 1.0g 雄蚕蛾(家蚕) TLC法鉴别 121457-200501 5.0g 大风子 TLC法鉴别 121458-200501 杂交瘤细胞;TBCD65.0g 梧桐子 TLC法鉴别 121459-200501 2.0g 满山白 TLC法鉴别 121460-200401 0.5g 功劳木 TLC法鉴别 121461-200401 3.0g 黄芪(膜荚黄芪) TLC法鉴别 121462-200702 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |